在RNA研究中的注意事項?HEPES可能抑制某些RNA酶活性,但高濃度會干擾逆轉錄反應。建議在RNA提取階段使用Tris-EDTA緩沖液替代。HEPES在RNA電泳中常用作緩沖液,其低離子強度減少了對RNA遷移的干擾。在體外轉錄反應中,HEPES緩沖液能維持反應體系的pH穩定。但需注意HEPES可能結合某些金屬離子,影響依賴金屬離子的RNA酶活性。HEPES溶液在光照下會生成過氧化物,需避光保存于4℃。使用前建議通過0.22 μm濾膜除菌,并檢測過氧化物含量(如硫代硫酸鈉滴定法)。過氧化物會氧化敏感的生物分子,如硫醇基團和某些熒光染料。長期儲存的HEPES溶液應分裝并避免反復凍融。商業化的HEPES粉末也應避光保存,因其在光照下會逐漸降解。HEPES溶液的pH會隨時間緩慢變化,建議使用前重新校準。注射用CDE已登記HEPES。河南藥用HEPES使用注意事項

HEPES在細胞培養中發揮作用的主要原理是基于其兩性離子特性和穩定的緩沖能力。以下是具體解釋:穩定的緩沖能力***的pH緩沖范圍:HEPES的有效緩沖范圍在pH6.88.2之間,覆蓋了大多數細胞生長所需的pH環境(pH7.27.4)。這使得HEPES能夠在細胞培養過程中提供穩定的pH環境,有利于細胞的生長和繁殖。CO2無關性:與許多其他緩沖液不同,HEPES的緩沖能力不受CO2濃度的影響。這意味著在開放式培養或細胞觀察時,即使培養基脫離了5%CO2的環境,HEPES也能維持pH的穩定,防止pH迅速升高。浙江HEPES大批量采購注射用HEPES國產緩沖液CDE已登記實驗室采購。

HEPES緩沖體系的應用
2022年4月15日,施維雅公司(SERVIER)宣布,其胰腺****藥物易安達(通用名:鹽酸伊立替康脂質體注射液)獲得中國國家藥品監督管理局(NMPA)正式批準上市。
伊立替康**早上市的制劑是鹽酸伊立替康注射液,在實際使用的過程中,該劑型逐漸暴露出一個問題:伊立替康的內酯環結構易水解,在pH>6條件下平衡快速向羧酸鹽型方向轉化。羧酸鹽型的伊立替康藥理活性低,毒性更強。生理條件(pH 7.4)下,由于血清蛋白優先與羧酸鹽絡合而使平衡偏向活性低的羧酸型,造成有效的內酯型比例過低,達到平衡時,“低效高毒”的羧酸鹽形式化合物所占比重高達90%。
q中包裹的伊立替康以有效的內酯型為主,這也意味著伊立替康脂質體內水相pH偏酸性(pH6左右)。而眾多文獻及Onivyde專利文件實施例均表明外水相pH在近中性時更有利于脂質的穩定,Onivyde專利文件的實施例表明外水相pH在7.25左右時脂質長期穩定性比較好。這需要伊立替康脂質體外水相和內水相存在pH差異,同時外水相偏堿性的緩沖對不能在長期儲存中進入內水相升高內水相pH,否則內水相中的伊立替康將會轉化為“低效高毒”的羧酸鹽形式。四、不易穿過脂質膜的羥乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)更適用于伊立替康脂質體
三、使用注意事項濃度控制:根據藥物制劑的需求和細胞類型,嚴格控制HEPES的濃度。一般來說,藥用級HEPES的使用濃度在適宜范圍內,以確保其緩沖效果和細胞保護作用。pH調節:在制備藥物制劑時,需要準確調節溶液的pH值至適合細胞生長或藥物發揮作用的范圍內。HEPES的加入有助于維持這一pH值的穩定。儲存條件:HEPES粉末應儲存在干燥、陰涼、通風良好的地方,避免陽光直射和高溫。配制好的HEPES溶液應存放在適當的溫度下,避免長時間暴露于空氣中或受到污染。與其他成分的兼容性:在制備藥物制劑時,需要注意HEPES與其他成分的兼容性。避免與可能產生不良反應或降低藥效的成分同時使用。國產注射用HEPES緩沖液CDE已登記狀態為A采購。

在電生理實驗中的關鍵作用?HEPES常用于膜片鉗實驗,其低離子強度特性可減少電流噪聲。建議與NaCl、KCl等電解質配合使用,終濃度不超過20 mM以避免膜電位干擾。HEPES緩沖液能穩定膜電位,減少因pH波動導致的通道活性變化。在神經元電生理記錄中,HEPES可替代碳酸氫鹽緩沖液,避免CO2逸出對記錄信號的干擾。HEPES的低金屬離子結合特性使其適合研究金屬離子敏感的通道蛋白。蛋白質純化中的緩沖選擇?HEPES緩沖液(pH 7.5)適用于離子交換層析,因其不與His標簽蛋白競爭結合鎳柱。但需避免與EDTA聯用,以防金屬離子沉淀。HEPES在蛋白質結晶中也常用作緩沖液,其低離子強度減少了對晶體生長的干擾。在蛋白質穩定性研究中,HEPES緩沖液能有效維持蛋白質的天然構象。HEPES還可用于蛋白質的等電點測定,因其緩沖范圍覆蓋了多數蛋白質的等電點區域。注射用HEPESCDE已登記。山西試劑級HEPES醫院采購
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從生產商來說,全球范圍內,HEPES緩沖液**廠商主要包括Hopax、ThermoFisher、OttoChemiePvtLtd、FUJIFILMIrvineScientific和Avantor等。2021年,全球***梯隊廠商主要有Hopax、ThermoFisher、OttoChemiePvtLtd和FUJIFILMIrvineScientific,***梯隊占有大約%的市場份額;第二梯隊廠商有Avantor、BioSpectra,Inc、QualityBiologicalInc和Suvchem等,共占有%份額。本報告研究全球與中國市場HEPES緩沖液的產能、產量、銷量、銷售額、價格及未來趨勢。重點分析全球與中國市場的主要廠商產品特點、產品規格、價格、銷量、銷售收入及全球和中國市場主要生產商的市場份額。歷史數據為2017至2021年,預測數據為2022至2028年。河南藥用HEPES使用注意事項