斑馬魚胚胎因其透明性與體外受精特性，成為化妝品急性毒性檢測的關(guān)鍵工具。依據(jù)OECD TG 236標(biāo)準(zhǔn)，實驗通過將斑馬魚胚胎暴露于不同濃度受試物溶液中，觀察48小時內(nèi)的發(fā)育異常（如卵凝結(jié)、體節(jié)異常、心包水腫等）并計算半數(shù)致死濃度（LC50）。例如，某美白精華液在濃度達(dá)31.5μg/mL時導(dǎo)致50%胚胎死亡，提示其潛在急性毒性風(fēng)險。該方法較傳統(tǒng)哺乳動物實驗周期縮短90%，成本降低80%，且符合動物福利“3R”原則。目前，該方法已納入《化妝品安全評估技術(shù)導(dǎo)則》，被云南貝泰妮、廣州嬌蘭等企業(yè)用于原料篩選，并形成T/HPCIA 004-2022團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)。然而，斑馬魚對不溶性粉體（如散粉）的檢測存在局限性，需結(jié)合細(xì)胞實驗完善評估體系。雙恒溫恒濕實驗區(qū)可同步容納200名受試者，保障大規(guī)模功效測試的高效開展。功效靶點機(jī)理實驗

盡管用于化妝品評價的創(chuàng)新模型和技術(shù)在不斷發(fā)展，但無論是斑馬魚模型、體外細(xì)胞模型還是皮膚器官芯片等均不能完全模擬體內(nèi)皮膚的真實結(jié)構(gòu)與功能，這使得離體皮膚評價模型逐漸進(jìn)入人們的視野。離體皮膚也被稱為皮膚外植體，它是由人體來源的皮膚組織經(jīng)體外培養(yǎng)而獲得的模型[26]。離體皮膚通過適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)方式，可在體外維持一定的組織活力，目前，已被廣泛應(yīng)用于化妝品功效測評、傷口愈合、皮膚相關(guān)疾病的研究中。離體皮膚是接近健康和患病皮膚生理機(jī)能的模型，包含完整的皮膚細(xì)胞類群如角質(zhì)形成細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、黑素細(xì)胞、朗格漢斯細(xì)胞;含有膠原蛋白、彈性蛋白、糖胺聚糖等細(xì)胞外基質(zhì);包含皮膚附屬物如汗腺等叨。本文將在下面章節(jié)重點概述離體皮膚模型及其在化妝品功效評價中的應(yīng)用。化妝品羰基化蛋白表達(dá)測試機(jī)構(gòu)修復(fù)功效檢測表明，使用該面霜后皮膚屏障功能恢復(fù)速度提升40%。

研究人員發(fā)現(xiàn)，離體培養(yǎng)48小時的全層皮膚可保持屏障特性，且能對不同強(qiáng)度的屏障破壞做出反應(yīng)，使用膠帶剝離或4小時十二烷基硫酸鈉(SLS)處理通過破壞皮膚結(jié)構(gòu)、促進(jìn)炎癥因子IL-6、IL-8的表達(dá)破壞皮膚屏障5]。使用1:1(v:v)乙mi:bing酮混合物對離體皮膚進(jìn)行損傷造模，PPAR-α激動劑RFV3可通過增加神經(jīng)酰胺、絲聚蛋白和轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶1的表達(dá)來促進(jìn)離體皮膚的屏障修護(hù)過程[”。離體皮膚模型還被用來評估清潔產(chǎn)品的功效，ZHOU等人通過對沐浴露A和沐浴露B處理的離體皮膚進(jìn)行免疫熒光染色發(fā)現(xiàn)，與水對照和沐浴露A處理相比，經(jīng)沐浴露B處理的離體皮膚在處理7天后，顆粒層和角質(zhì)層中絲聚蛋白的表達(dá)明顯減少，證明沐浴露B對皮膚屏障具有破壞作用，此外，使用MTT檢測離體皮膚的組織活力也是用來評價皮膚屏障修護(hù)功效的重要指標(biāo)。

不同于新興的3D重組皮膚模型、皮膚類organ和器官芯片模型，離體皮膚雖然擁有較為久遠(yuǎn)的發(fā)展歷史，但由于其具有倫理限制、獲取困難、個體差異等特殊的局限性，在化妝品領(lǐng)域的應(yīng)用并不寬泛。與傳統(tǒng)的細(xì)胞模型相比，離體皮膚不僅可以在分子細(xì)胞水平實現(xiàn)對待測物的評估，更能在組織水平評估待測物的功效，具有良好的可視化和宣傳效果。已有大量的研究表明，離體皮膚是研究經(jīng)皮給藥、化妝品及原材料功效、藥品和化妝品安全性、刺激性和毒性的有效替代模型，也逐漸被國內(nèi)外藥品和化妝品的原料商、出品方、監(jiān)管機(jī)構(gòu)和消費(fèi)者所認(rèn)可。離體皮膚在化妝品領(lǐng)域的應(yīng)用或?qū)浹a(bǔ)化妝品安全性和功效評價體系的缺口。然而，目前國內(nèi)外仍缺乏離體皮膚用于化妝品功效評價的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)和監(jiān)督管理規(guī)范，未來可通過起草離體皮膚評價方法的技術(shù)指南、制定離體皮膚用于化妝品功效評價的標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范、完善化妝品安全監(jiān)管的法律法規(guī)文件，進(jìn)一步提高離體皮膚模型在行業(yè)內(nèi)的認(rèn)可度、擴(kuò)大離體皮膚模型在化妝品領(lǐng)域的應(yīng)用范圍。美白功效檢測報告顯示，連續(xù)使用該面膜2周后，受試者膚色均勻度提升2個色階。

在“一白遮百丑”的審美趨勢下，美白類化妝品市場持續(xù)火熱，但產(chǎn)品實際功效參差不齊。環(huán)特人體功效實驗室推出的人體淡斑美白功效測試方案，旨在以科學(xué)嚴(yán)謹(jǐn)?shù)牧鞒虨橄M(fèi)者揭開美白產(chǎn)品的真實效果。該方案通過嚴(yán)格篩選志愿者，將受試者后背分為試驗側(cè)與對照側(cè)，結(jié)合研究者評估、視覺評估及儀器測量等多元手段，對產(chǎn)品使用前后的皮膚黑色素含量、ITA值等關(guān)鍵指標(biāo)進(jìn)行動態(tài)監(jiān)測。從D0到D28的28天周期內(nèi)，通過5個關(guān)鍵時間節(jié)點的精細(xì)數(shù)據(jù)采集，不僅能直觀展現(xiàn)產(chǎn)品的短期即時效果，更能追蹤長期改善情況，為化妝品企業(yè)提供可靠的功效驗證，也為消費(fèi)者選購提供科學(xué)依據(jù)，推動美白化妝品市場向更規(guī)范、透明的方向發(fā)展。抗污染防護(hù)：模擬PM2.5吸附實驗，驗證產(chǎn)品隔離顆粒物附著功效。化妝品安全評估和功效宣稱

美白證明：采用黑色素含量測定儀，驗證產(chǎn)品抑制酪氨酸酶活性能力。功效靶點機(jī)理實驗

轉(zhuǎn)基因斑馬魚技術(shù)為化妝品中雌jisu類物質(zhì)檢測提供了高靈敏度工具。依據(jù)GB/T 45221-2025標(biāo)準(zhǔn)，實驗通過將受試物暴露于攜帶cyp19a1b啟動子驅(qū)動GFP的轉(zhuǎn)基因斑馬魚胚胎，觀察肝臟區(qū)域熒光強(qiáng)度變化。例如，某含鄰苯二甲酸酯的指甲油可使斑馬魚胚胎熒光強(qiáng)度增加3倍，提示其內(nèi)分泌干擾風(fēng)險。該方法基于雌jisu受體（ER）介導(dǎo)的基因表達(dá)調(diào)控機(jī)制，可檢測低至0.1ng/L的雌jisu活性物質(zhì)，較傳統(tǒng)酵母雙雜交法靈敏度提升100倍。目前，該技術(shù)已應(yīng)用于乳制品、化妝品等多領(lǐng)域，并由完美、蒙牛等企業(yè)聯(lián)合制定團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)。然而，斑馬魚對雄jisu、甲狀腺jisu等干擾物的檢測仍需開發(fā)特異性轉(zhuǎn)基因品系，未來需結(jié)合多組學(xué)技術(shù)完善評估體系。功效靶點機(jī)理實驗