細(xì)胞水平的功能性檢測(cè)是藥物篩選和生物學(xué)研究的基礎(chǔ)。均相化學(xué)發(fā)光為此提供了多種穩(wěn)健的檢測(cè)方案。比較經(jīng)典的是基于ATP含量的細(xì)胞活力/增殖/毒性檢測(cè)。活細(xì)胞內(nèi)的ATP與熒光素酶-熒光素反應(yīng)直接偶聯(lián),產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光信號(hào),其強(qiáng)度與活細(xì)胞數(shù)成正比。該方法操作簡(jiǎn)單(一步加樣裂解/檢測(cè)),靈敏度高,線(xiàn)性范圍寬。此外,針對(duì)細(xì)胞凋亡,可通過(guò)檢測(cè)Caspase酶活性(使用化學(xué)發(fā)光的Caspase底物)或膜磷脂酰絲氨酸外露(使用與化學(xué)發(fā)光檢測(cè)偶聯(lián)的Annexin V類(lèi)似物)來(lái)進(jìn)行均相分析。這些方法均實(shí)現(xiàn)了在微孔板中對(duì)細(xì)胞狀態(tài)的快速、定量評(píng)估。均相化學(xué)發(fā)光的信號(hào)放大機(jī)制是怎樣的?吉林CRET技術(shù)均相發(fā)光技術(shù)

外泌體等細(xì)胞外囊泡(EVs)是疾病診斷的潛在生物標(biāo)志物來(lái)源。其分離和表征通常繁瑣。均相化學(xué)發(fā)光技術(shù)提供了快速分析方案。利用EVs表面普遍或特異性表達(dá)的膜蛋白(如CD9、CD63、CD81或相關(guān)抗原),將針對(duì)不同蛋白的抗體分別偶聯(lián)Alpha供體珠和受體珠。當(dāng)EVs存在時(shí),多個(gè)抗體結(jié)合到同一個(gè)EV上,拉近微珠產(chǎn)光信號(hào),從而實(shí)現(xiàn)EVs的定量。通過(guò)使用不同抗體組合,還可以對(duì)EVs進(jìn)行亞群分型分析。這種方法無(wú)需超速離心,操作簡(jiǎn)單,有望用于臨床樣本的快速篩查。吉林CRET技術(shù)均相發(fā)光技術(shù)體外診斷新機(jī)遇!均相發(fā)光新產(chǎn)品,助您搶占先機(jī)!

生物制藥(如單克隆抗體、重組蛋白、疫苗)的工藝開(kāi)發(fā)和質(zhì)量控制(QC)需要大量快速、精確的分析。均相化學(xué)發(fā)光技術(shù)在其中扮演了重要角色:滴度測(cè)定:使用Protein A或靶抗原介導(dǎo)的均相免疫分析,快速測(cè)定細(xì)胞培養(yǎng)上清或純化樣品中的抗體濃度。宿主細(xì)胞蛋白(HCP)殘留檢測(cè):使用基于多克隆抗體的Alpha或類(lèi)似技術(shù),高靈敏度地監(jiān)測(cè)純化工藝中HCP的去除情況。生物學(xué)活性測(cè)定:如抗體依賴(lài)性細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性(ADCC)或補(bǔ)體依賴(lài)性細(xì)胞毒性(CDC)報(bào)告基因檢測(cè),利用效應(yīng)細(xì)胞表達(dá)熒光素酶,靶細(xì)胞被殺傷后報(bào)告基因信號(hào)下降。這些應(yīng)用加速了生物工藝的優(yōu)化和產(chǎn)品放行。
化學(xué)發(fā)光共振能量轉(zhuǎn)移(CRET)是另一種重要的均相信號(hào)產(chǎn)生機(jī)制。它本質(zhì)上是一種無(wú)需外部光激發(fā)的內(nèi)源性FRET。在CRET中,供體是化學(xué)發(fā)光反應(yīng)產(chǎn)生的激發(fā)態(tài)分子(如氧化的魯米諾或吖啶酯),其發(fā)射的光子能量直接傳遞給鄰近的熒光受體(如熒光染料、量子點(diǎn)或納米材料),促使受體發(fā)射出波長(zhǎng)紅移的熒光。在均相檢測(cè)設(shè)計(jì)中,可將化學(xué)發(fā)光分子與受體分別標(biāo)記在相互作用的生物分子對(duì)上。只有當(dāng)目標(biāo)分子存在并促使兩者結(jié)合時(shí),供體與受體才能充分靠近,發(fā)生有效的CRET,產(chǎn)生特征性的受體熒光信號(hào)。通過(guò)檢測(cè)受體熒光,可以避免直接化學(xué)發(fā)光可能存在的背景干擾,并獲得更佳的光譜分辨能力,利于多重檢測(cè)。降本增效新方案,為您節(jié)省實(shí)驗(yàn)成本!

在重癥炎癥(如膿毒癥)、CAR-T診療或某些自身免疫病中,細(xì)胞因子風(fēng)暴是危及生命的狀態(tài),需要快速監(jiān)測(cè)多種炎癥因子。基于微球陣列的均相化學(xué)發(fā)光多重檢測(cè)技術(shù),能夠從單份微量血清或血漿樣本中,同時(shí)定量檢測(cè)IL-6、IL-1β、TNF-α、IFN-γ等十幾種關(guān)鍵細(xì)胞因子的濃度。這種高通量、多參數(shù)的分析能力,使得臨床醫(yī)生或研究人員能夠多方面、快速地掌握患者的炎癥風(fēng)暴譜系,評(píng)估嚴(yán)重程度,并監(jiān)測(cè)診療干預(yù)(如抗細(xì)胞因子抗體)的效果,為精細(xì)免疫調(diào)控提供依據(jù)。均相化學(xué)發(fā)光對(duì)檢測(cè)環(huán)境有什么特殊要求?安徽均相化學(xué)發(fā)光均相發(fā)光與普通發(fā)光的區(qū)別
均相化學(xué)發(fā)光在疾病早期篩查中能發(fā)揮怎樣的作用?吉林CRET技術(shù)均相發(fā)光技術(shù)
微流控技術(shù)通過(guò)縱微尺度流體,能夠?qū)崿F(xiàn)多種試劑的精確混合、反應(yīng)和檢測(cè)的集成。將均相發(fā)光檢測(cè)整合到微流控芯片中,有望進(jìn)一步實(shí)現(xiàn)“芯片實(shí)驗(yàn)室”(Lab-on-a-Chip)的愿景。例如,在芯片微通道內(nèi)完成細(xì)胞的裂解、目標(biāo)蛋白的免疫識(shí)別和均相發(fā)光反應(yīng),并通過(guò)集成的微型光學(xué)元件檢測(cè)信號(hào)。這種結(jié)合可以極大減少試劑用量(降至納升級(jí))、縮短反應(yīng)時(shí)間、提高分析速度,并實(shí)現(xiàn)便攜化,為床邊診斷(POCT)和現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)提供新的解決方案。Duo'z吉林CRET技術(shù)均相發(fā)光技術(shù)