微流控技術通過縱微尺度流體,能夠實現多種試劑的精確混合、反應和檢測的集成。將均相發光檢測整合到微流控芯片中,有望進一步實現“芯片實驗室”(Lab-on-a-Chip)的愿景。例如,在芯片微通道內完成細胞的裂解、目標蛋白的免疫識別和均相發光反應,并通過集成的微型光學元件檢測信號。這種結合可以極大減少試劑用量(降至納升級)、縮短反應時間、提高分析速度,并實現便攜化,為床邊診斷(POCT)和現場檢測提供新的解決方案。Duo'z均相化學發光技術的原理是什么,如何實現檢測?江西浦光生物均相發光

時間分辨熒光共振能量轉移(TR-FRET)是FRET技術的升級版,它結合了FRET的高空間分辨率和時間分辨熒光(TRF)的長壽命信號優勢。TR-FRET使用鑭系元素螯合物(如銪Eu3+、鋱Tb3+)作為供體。這類供體具有熒光壽命極長(微秒至毫秒級)的特點。檢測時,使用脈沖光源激發后,在短暫延遲后(例如50-100微秒)再測量熒光,此時普通背景熒光(壽命只納秒級)已完全衰減,而長壽命的供體熒光及其通過FRET轉移產生的受體熒光(通常使用別藻藍蛋白APC或d2等作為受體)則被特異性檢測到。這一設計幾乎完全消除了樣本基質、微孔板及試劑本身的短壽命背景熒光干擾,將檢測的信噪比和靈敏度提升至新的高度,特別適用于復雜生物樣本(如血清、細胞裂解液)的直接檢測。吉林化學發光均相發光技術均相化學發光,為您提供更優解決方案!

熒光共振能量轉移(FRET)是均相發光技術中應用比較多方面的信號產生機制之一。其原理是:當一個熒光基團(供體,Donor)的發射光譜與另一個熒光基團或淬滅基團(受體,Acceptor)的吸收光譜有足夠重疊,且兩者距離非常接近(通常1-10納米)時,供體的激發態能量會以非輻射方式轉移給受體。在均相檢測中,常將供體和受體分別標記在相互作用的生物分子對(如一對抗體、或酶與底物肽)上。當目標分子存在并促使這對生物分子結合時,供體與受體被拉近,發生有效的FRET,導致供體熒光淬滅,受體熒光增強(如果受體是熒光團)。通過監測供體與受體熒光強度的比率變化,即可高靈敏度、高特異性地定量目標分析物。
細胞水平的功能性檢測是藥物篩選和生物學研究的基礎。均相化學發光為此提供了多種穩健的檢測方案。比較經典的是基于ATP含量的細胞活力/增殖/毒性檢測。活細胞內的ATP與熒光素酶-熒光素反應直接偶聯,產生化學發光信號,其強度與活細胞數成正比。該方法操作簡單(一步加樣裂解/檢測),靈敏度高,線性范圍寬。此外,針對細胞凋亡,可通過檢測Caspase酶活性(使用化學發光的Caspase底物)或膜磷脂酰絲氨酸外露(使用與化學發光檢測偶聯的Annexin V類似物)來進行均相分析。這些方法均實現了在微孔板中對細胞狀態的快速、定量評估。均相化學發光在傳染病診斷中的應用效果如何?

評估疫苗免疫效果或康復者血清中和能力的關鍵是病毒中和抗體檢測。傳統的空斑減少中和試驗(PRNT)耗時費力。基于假病毒系統的均相發光中和試驗已成為高通量替代方案。將表達熒光素酶的報告基因包裝進假病毒顆粒(攜帶目標病毒的囊膜蛋白)。當假病毒炎癥細胞時,會驅動熒光素酶表達。如果樣本中存在中和抗體,則會阻斷炎癥,導致熒光素酶信號下降。檢測時只需在炎癥后裂解細胞并加入發光底物,即可實現快速、定量、高通量的中和抗體滴度測定,在COVID-19等疫病中發揮了重要作用。浦光生物均相化學發光,一步到位!北京體外診斷均相發光技術
均相化學發光技術的檢測流程是怎樣的,復雜嗎?江西浦光生物均相發光
相較于熒光或比色法,化學發光作為均相檢測的信號系統具有多重獨特優勢。首先,它無需外部激發光源,從而完全避免了光源不穩定、樣本自發熒光及光散射所帶來的背景干擾,理論上能獲得極高的信噪比和靈敏度。其次,化學發光反應產生的光子信號強度在一定范圍內與反應物濃度直接相關,動態范圍寬,可跨越數個數量級。再者,化學發光體系(如魯米諾、吖啶酯)的反應動力學多樣,可滿足從快速閃光到持久輝光的不同檢測需求。比較后,化學發光反應的啟動通常由單一試劑(如過氧化氫、堿)觸發,易于控制,非常適合自動化儀器上的順序注射和即時讀數。這些特性使其成為實現超靈敏、高穩健性均相檢測的理想信號輸出模式。江西浦光生物均相發光