使用羥乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)緩沖體系時的注意事項由于哌嗪基團的存在,當羥乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)暴露于光線中時,會產生H2O2,這對培養的細胞或其它有生物活性的物體產生毒性,同時對氧化還原敏感的物質不宜共同使用,因此羥乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)作為緩沖液的操作應盡量在避光條件下進行。羥乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)在生化領域常見的使用濃度為10-25mM,當濃度低于10mM時緩沖能力較弱,不能起到較好的緩沖效果,當濃度較高時對一些細胞可能具有毒害作用。艾偉拓長期穩定供應注射級海藻糖、蔗糖、TRIS/TRIS-HCl、羥乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)等生物保護劑與緩沖鹽,GMP條件生產,中美雙報,供注射用,**內***,DNase&RNasefree,符合國際主流藥典標準,助力重組蛋白疫苗、mRNA疫苗、腺病毒載體疫苗、脂質體、單雙抗、抗體偶聯藥物等生物制劑生產與中外申報!國產注射用HEPES緩沖液CDE已登記狀態為A詢價。福建HEPES現貨供應

HEPES的化學結構與基本特性?HEPES是一種兩性離子緩沖劑,化學式為C8H18N2O4S,分子量238.3 g/mol。其結構由哌嗪環和乙磺酸基團組成,pKa值為7.5(25℃),在pH 6.8-8.2范圍內具有優異的緩沖能力。作為Good's緩沖液家族成員,HEPES對細胞無毒性,且不與金屬離子螯合,適合含金屬離子的實驗體系。其水溶性(>1 M)和低滲透壓特性使其成為細胞培養的理想選擇。HEPES的緩沖能力在4-37℃范圍內變化<10%,優于Tris緩沖液。但高溫(>50℃)會導致降解,需避免高壓滅菌。HEPES溶液在光照下會生成過氧化物,需避光保存于4℃。使用前建議通過0.22 μm濾膜除菌,并檢測過氧化物含量(如硫代硫酸鈉滴定法)。浙江大批量HEPES大批量采購注射用HEPES緩沖液中美雙報企業采購。

羥乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)是一種不能輕易穿過生物膜的緩沖。 它適用于伊立替康脂質體,因為它可以在穩定脂質體外水相酸堿度為弱堿性的情況下,不改變內水相酸性酸堿度。HEPES 的用量應該在10-25mM 之間,10mM以下的用量會導致緩沖能力較弱, 25mM以上可能對一些細胞造成不良反應。HEPES的使用以及操作應盡量在避光的情況下進行。這是因為在燈光下,HEPES會產生H2O2,而H2O2對活性的物體來說是有害的,這對培養的細胞會造成一定的傷害。
伊立替康**早上市的制劑是鹽酸伊立替康注射液,在實際使用的過程中,該劑型逐漸暴露出一個問題:伊立替康的內酯環結構易水解,在pH>6條件下平衡快速向羧酸鹽型方向轉化。羧酸鹽型的伊立替康藥理活性低,毒性更強。生理條件(pH 7.4)下,由于血清蛋白優先與羧酸鹽絡合而使平衡偏向活性低的羧酸型,造成有效的內酯型比例過低,達到平衡時,“低效高毒”的羧酸鹽形式化合物所占比重高達90%。
q中包裹的伊立替康以有效的內酯型為主,這也意味著伊立替康脂質體內水相pH偏酸性(pH6左右)。而眾多文獻及Onivyde專利文件實施例均表明外水相pH在近中性時更有利于脂質的穩定,Onivyde專利文件的實施例表明外水相pH在7.25左右時脂質長期穩定性比較好。這需要伊立替康脂質體外水相和內水相存在pH差異,同時外水相偏堿性的緩沖對不能在長期儲存中進入內水相升高內水相pH,否則內水相中的伊立替康將會轉化為“低效高毒”的羧酸鹽形式。四、不易穿過脂質膜的羥乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)更適用于伊立替康脂質體而羥乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)作為一種不易穿過生物膜的緩沖對,可以在穩定脂質體外水相pH為弱堿性的同時,不改變內水相酸性pH,非常適用于伊立替康脂質體。 注射用HEPES國產緩沖液CDE已登記。

HEPES在細胞培養中發揮作用的主要原理是基于其兩性離子特性和穩定的緩沖能力。以下是具體解釋:穩定的緩沖能力***的pH緩沖范圍:HEPES的有效緩沖范圍在pH6.88.2之間,覆蓋了大多數細胞生長所需的pH環境(pH7.27.4)。這使得HEPES能夠在細胞培養過程中提供穩定的pH環境,有利于細胞的生長和繁殖。CO2無關性:與許多其他緩沖液不同,HEPES的緩沖能力不受CO2濃度的影響。這意味著在開放式培養或細胞觀察時,即使培養基脫離了5%CO2的環境,HEPES也能維持pH的穩定,防止pH迅速升高。國內艾偉拓注射用HEPES已登記?遼寧7365-45-9HEPES實驗室采購
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?7. 在RNA研究中的注意事項?HEPES可能抑制某些RNA酶活性,但高濃度會干擾逆轉錄反應。建議在RNA提取階段使用Tris-EDTA緩沖液替代。?8. 與溫度變化的穩定性?HEPES緩沖能力在4-37℃范圍內變化<10%,優于Tris緩沖液。但高溫(>50℃)會導致降解,需避免高壓滅菌。?9.在流式細胞術中的優化?HEPES(10mM)可維持細胞懸液pH穩定,減少熒光染料淬滅。但需與FBS或BSA聯用以防止非特異性結合。艾偉拓HEPES現已登記且登記狀態為A,歡迎采購詢價福建HEPES現貨供應