對細胞的保護作用降低細胞毒性：某些化學物質在培養基中容易產生細胞毒性，影響細胞的生長和繁殖。HEPES能夠降低這些化學物質的細胞毒性，從而保護細胞免受損傷。形成保護層：HEPES分子還可以通過吸附在細胞表面，形成一層保護層，減少細胞間的摩擦和碰撞，降低細胞的損傷風險。這有助于提高細胞的生存率和實驗結果的可靠性。綜上所述，HEPES在細胞培養中發揮作用的主要原理是通過其兩性離子特性增加溶液離子濃度和滲透壓，以及通過其穩定的緩沖能力維持細胞生長所需的pH環境。此外，HEPES還能降低細胞毒性、形成保護層等，對細胞具有保護作用。這些特性使得HEPES成為細胞培養中不可或缺的緩沖劑之一。國內AVT注射用HEPES已登記。上海高純度HEPES醫院采購

HEPES在細胞培養中發揮作用的主要原理是基于其兩性離子特性和穩定的緩沖能力。以下是具體解釋：穩定的緩沖能力***的pH緩沖范圍：HEPES的有效緩沖范圍在pH6.88.2之間，覆蓋了大多數細胞生長所需的pH環境（pH7.27.4）。這使得HEPES能夠在細胞培養過程中提供穩定的pH環境，有利于細胞的生長和繁殖。CO2無關性：與許多其他緩沖液不同，HEPES的緩沖能力不受CO2濃度的影響。這意味著在開放式培養或細胞觀察時，即使培養基脫離了5%CO2的環境，HEPES也能維持pH的穩定，防止pH迅速升高。浙江備案登記號HEPES藥用采購AVT長期穩定供應注射級海藻糖、蔗糖、TRIS/TRIS-HCl、HEPES等生物保護劑與緩沖鹽。

注意事項濃度控制：根據實驗需求和細胞類型，嚴格控制HEPES的濃度。一般來說，培養液內含20mmol/L HEPES即可達到良好的緩沖效果。pH調節：在配制含有HEPES的培養基時，需要準確調節pH值至適合細胞生長的范圍內。儲存條件：配制好的含有HEPES的培養基應存放在適當的溫度下，避免長時間暴露于空氣中或受到污染。綜上所述，HEPES緩沖體系具有***的緩沖范圍、CO2無關性、低毒性、穩定性強和膜不透性等優勢，在細胞培養和其他生物化學研究中發揮著重要作用。通過合理控制HEPES的濃度和配制方法，可以維持細胞培養環境的pH穩定，提高細胞的生長和代謝效率。

在RNA研究中的注意事項?HEPES可能抑制某些RNA酶活性，但高濃度會干擾逆轉錄反應。建議在RNA提取階段使用Tris-EDTA緩沖液替代。HEPES在RNA電泳中常用作緩沖液，其低離子強度減少了對RNA遷移的干擾。在體外轉錄反應中，HEPES緩沖液能維持反應體系的pH穩定。但需注意HEPES可能結合某些金屬離子，影響依賴金屬離子的RNA酶活性。HEPES溶液在光照下會生成過氧化物，需避光保存于4℃。使用前建議通過0.22 μm濾膜除菌，并檢測過氧化物含量（如硫代硫酸鈉滴定法）。過氧化物會氧化敏感的生物分子，如硫醇基團和某些熒光染料。長期儲存的HEPES溶液應分裝并避免反復凍融。商業化的HEPES粉末也應避光保存，因其在光照下會逐漸降解。HEPES溶液的pH會隨時間緩慢變化，建議使用前重新校準。注射用HEPESCDE已登記；

三、使用注意事項濃度控制：根據藥物制劑的需求和細胞類型，嚴格控制HEPES的濃度。一般來說，藥用級HEPES的使用濃度在適宜范圍內，以確保其緩沖效果和細胞保護作用。pH調節：在制備藥物制劑時，需要準確調節溶液的pH值至適合細胞生長或藥物發揮作用的范圍內。HEPES的加入有助于維持這一pH值的穩定。儲存條件：HEPES粉末應儲存在干燥、陰涼、通風良好的地方，避免陽光直射和高溫。配制好的HEPES溶液應存放在適當的溫度下，避免長時間暴露于空氣中或受到污染。與其他成分的兼容性：在制備藥物制劑時，需要注意HEPES與其他成分的兼容性。避免與可能產生不良反應或降低藥效的成分同時使用。注射用HEPES緩沖液中美雙報。山東藥用輔料HEPES現貨供應

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伊立替康**早上市的制劑是鹽酸伊立替康注射液，在實際使用的過程中，該劑型逐漸暴露出一個問題：伊立替康的內酯環結構易水解，在pH>6條件下平衡快速向羧酸鹽型方向轉化。羧酸鹽型的伊立替康藥理活性低，毒性更強。生理條件（pH 7.4）下，由于血清蛋白優先與羧酸鹽絡合而使平衡偏向活性低的羧酸型，造成有效的內酯型比例過低，達到平衡時，“低效高毒”的羧酸鹽形式化合物所占比重高達90%。

q中包裹的伊立替康以有效的內酯型為主，這也意味著伊立替康脂質體內水相pH偏酸性（pH6左右）。而眾多文獻及Onivyde專利文件實施例均表明外水相pH在近中性時更有利于脂質的穩定，Onivyde專利文件的實施例表明外水相pH在7.25左右時脂質長期穩定性比較好。這需要伊立替康脂質體外水相和內水相存在pH差異，同時外水相偏堿性的緩沖對不能在長期儲存中進入內水相升高內水相pH，否則內水相中的伊立替康將會轉化為“低效高毒”的羧酸鹽形式。四、不易穿過脂質膜的羥乙基哌嗪乙磺酸（HEPES）更適用于伊立替康脂質體而羥乙基哌嗪乙磺酸（HEPES）作為一種不易穿過生物膜的緩沖對，可以在穩定脂質體外水相pH為弱堿性的同時，不改變內水相酸性pH，非常適用于伊立替康脂質體。 上海高純度HEPES醫院采購