HEPES，全稱為4-(2-羥乙基)-1-哌嗪乙磺酸，又名N-(2-羥乙基)哌嗪-N'-2-乙烷磺酸或N-2-Hydroxyethylpiperazine-N-2-EthaneSulfonicAcid，是一種在生物化學和分子生物學領域中廣泛應用的化學物質。以下是對HEPES的詳細介紹：配制方法單一HEPES溶液：可以配制單純的HEPES+NaOH溶液。例如，要配制500ml 1M HEPES，pH=7.0的溶液，可以將119.15g HEPES溶解在400ml蒸餾水中，加0.51M的NaOH水溶液調節至所需pH（HEPES的有效pH范圍是6.88.2），然后用蒸餾水定容至500ml，于4攝氏度保存。HEPES+鹽溶液：也可以配制含有其他成分的HEPES溶液。例如，將HEPES、NaCl、Na2HPO4·7H2O等按一定比例溶解在蒸餾水中，用NaOH調節pH值后定容。注射用CDE已登記HEPES；貴州現貨HEPES實驗室采購

HEPES在細胞培養中發揮作用的主要原理是基于其兩性離子特性和穩定的緩沖能力。以下是具體解釋：一、兩性離子特性HEPES是一種兩性離子緩沖劑，其分子結構中的磺酸基團和哌嗪基團能夠分別與水分子結合形成氫鍵。這種結構使得HEPES能夠在溶液中增加離子濃度，從而調節滲透壓。隨著HEPES濃度的增加，溶液中的離子濃度相應提高，導致滲透壓的增大。這種滲透壓的增加有助于維持細胞的正常水分平衡，保持細胞的正常形態和功能。HEPES供注射用 藥用輔料河南藥用HEPES注射用HEPES國產緩沖液CDE已登記。

HEPES在細胞培養中的應用?HEPES***用于哺乳動物細胞培養，尤其在CO2培養箱外操作時（如顯微鏡觀察），可替代碳酸氫鹽緩沖系統。推薦濃度為10-25 mM，過高濃度可能抑制細胞生長。需注意HEPES對光敏感，需避光保存。HEPES緩沖液能有效維持細胞外pH穩定，防止因CO2逸出導致的培養基堿化。在胚胎培養中，HEPES需嚴格過濾除菌，且濃度不超過15 mM，以避免影響囊胚發育。建議與**酸鈉聯用增強緩沖能力。HEPES還可用于原代細胞培養，其低離子強度特性減少了對細胞的機械損傷。

使用注射級氨丁三醇緩沖劑的注意事項：1.Tris緩沖液的pH值受溫度影響大，△pKa／℃＝－0.031，例如：4℃時緩沖液的pH＝8.4，則37℃時的pH＝7.4，所以一定要在使用溫度下進行配制，室溫下配制的Tris-HCl緩沖液不能用于0℃～4℃。2.Tris緩沖液的pH值受溶液濃度影響較大，緩沖液稀釋十倍，pH值的變化大于0.13.Tris在一定程度上與各種分子反應，包括RNA酶抑制劑，醛，酶，DNA以及常見金屬如Cr3+，Fe3+，Ni2+，Co2+和Cu2+等，在有些系統中會起抑制作用，在配制過程中需考慮與其他組分之間的相互作用；4.Tris緩沖液易吸收空氣中的CO2，配制的緩沖液要注意蓋嚴密封；5.Tris緩沖液對某些pH電極發生一定的干擾作用，需使用與注射級氨丁三醇溶液具有兼容性的電極；6.Tris緩沖液不適用于二喹啉甲酸（BCA）測定；7.吸入，攝入，皮膚吸收注射級氨丁三醇可造成傷害，操作時需戴好手套和護目鏡；8.作為蛋白緩沖液時，若后續工作需要質譜，則不適宜用注射級氨丁三醇，比較好換成其他質譜儀可耐受的緩沖液。注射用HEPESCDE已登記登記狀態為A。

HEPES緩沖體系在生物化學和細胞生物學研究中扮演著至關重要的角色。以下是對HEPES緩沖體系的詳細介紹：在細胞培養中的應用維持pH穩定：在細胞培養中，HEPES能夠維持培養液的pH穩定，為細胞提供一個適宜的生長環境。這對于細胞的生長、繁殖和代謝過程至關重要。減少乳酸積累：在某些培養基中，如RPMI-1640，HEPES有助于減緩細胞代謝產生的大量乳酸，從而避免培養液pH下降，抑制細胞生長。適用于無CO2環境：在需要避免CO2干擾的實驗中，如細胞觀察、轉染等，HEPES能夠確保細胞在一個穩定的酸堿環境中生長。國產注射用HEPES緩沖液中美雙報；河南藥用HEPES

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在電生理實驗中的關鍵作用?HEPES常用于膜片鉗實驗，其低離子強度特性可減少電流噪聲。建議與NaCl、KCl等電解質配合使用，終濃度不超過20 mM以避免膜電位干擾。HEPES緩沖液能穩定膜電位，減少因pH波動導致的通道活性變化。在神經元電生理記錄中，HEPES可替代碳酸氫鹽緩沖液，避免CO2逸出對記錄信號的干擾。HEPES的低金屬離子結合特性使其適合研究金屬離子敏感的通道蛋白。蛋白質純化中的緩沖選擇?HEPES緩沖液（pH 7.5）適用于離子交換層析，因其不與His標簽蛋白競爭結合鎳柱。但需避免與EDTA聯用，以防金屬離子沉淀。HEPES在蛋白質結晶中也常用作緩沖液，其低離子強度減少了對晶體生長的干擾。在蛋白質穩定性研究中，HEPES緩沖液能有效維持蛋白質的天然構象。HEPES還可用于蛋白質的等電點測定，因其緩沖范圍覆蓋了多數蛋白質的等電點區域。貴州現貨HEPES實驗室采購