均相發(fā)光技術也普遍用于細胞水平的分析,如細胞活力、凋亡和化合物毒性篩選。例如,基于ATP含量的細胞活力檢測:活細胞含有豐富的ATP,細胞裂解后釋放的ATP可與熒光素酶反應產生化學發(fā)光,發(fā)光強度與活細胞數量成正比。整個過程在同一個孔中加入裂解/檢測試劑即可完成,是均相操作的典范。對于細胞凋亡,可通過檢測caspase酶活性(使用熒光底物或發(fā)光底物)來實現均相分析。細胞毒性檢測則可測量因細胞膜損傷而釋放的胞內酶(如乳酸脫氫酶LDH)活性,通過偶聯(lián)的發(fā)光反應來定量。這些方法實現了對細胞狀態(tài)的快速、高通量、自動化評估。降本增效新方案,為您節(jié)省實驗成本!江蘇均相發(fā)光免疫分析細胞水平的功能性檢測是藥物篩選...
盡管優(yōu)勢明顯,均相發(fā)光技術也存在一些挑戰(zhàn)和局限性。首先,某些技術(如FRET)可能受到樣本自身顏色(如血紅蛋白)、濁度或某些化合物(如具有強熒光或淬滅特性的藥物)的光學干擾。其次,均相檢測通常對試劑的特異性和純度要求極高,任何非特異性結合或聚集都可能導致假陽性信號。第三,開發(fā)均相檢測方法需要進行復雜的探針設計和標記優(yōu)化,前期開發(fā)成本較高。比較后,對于某些極低豐度的靶標,其靈敏度有時可能仍低于經過多步洗滌和信號放大的異相方法(如化學發(fā)光免疫分析CLIA)。均相化學發(fā)光在傳染病診斷中的應用效果如何?上海均相化學發(fā)光均相發(fā)光臨床檢驗醫(yī)學中的應用研究相較于熒光或比色法,化學發(fā)光作為均相檢測的信號系統(tǒng)具...
在重癥炎癥(如膿毒癥)、CAR-T診療或某些自身免疫病中,細胞因子風暴是危及生命的狀態(tài),需要快速監(jiān)測多種炎癥因子。基于微球陣列的均相化學發(fā)光多重檢測技術,能夠從單份微量血清或血漿樣本中,同時定量檢測IL-6、IL-1β、TNF-α、IFN-γ等十幾種關鍵細胞因子的濃度。這種高通量、多參數的分析能力,使得臨床醫(yī)生或研究人員能夠多方面、快速地掌握患者的炎癥風暴譜系,評估嚴重程度,并監(jiān)測診療干預(如抗細胞因子抗體)的效果,為精細免疫調控提供依據。專注體外診斷,均相化學發(fā)光凍干試劑,品質值得信賴!天津POCT產品均相發(fā)光廠家有哪些在傳染病診斷領域,均相化學發(fā)光技術主要用于開發(fā)高靈敏的抗原或抗體檢測方法...
均相發(fā)光技術比較明顯的優(yōu)勢是其操作的極度簡便性所帶來的高通量檢測能力。由于摒棄了所有分離步驟,典型的均相發(fā)光檢測只需將樣本、識別元件(如抗體)和發(fā)光試劑依次加入微孔板中,混合孵育后即可直接讀數。這種“加樣-孵育-檢測”的模式,將復雜的多步流程簡化為一步或兩步,不僅大幅縮短了檢測時間(通常可在幾分鐘到一小時內完成),還大限度地減少了人為操作誤差和交叉污染的風險。這一特性使其完美適配現代自動化液體處理系統(tǒng)和多通道檢測儀,能夠輕松實現每天處理數萬甚至數十萬個樣本的超高通量篩選,在藥物發(fā)現、功能基因組學等需要海量數據積累的領域具有不可替代的價值。均相化學發(fā)光在 POCT(即時檢驗)領域的應用現狀?湖南...
評估疫苗免疫效果或康復者血清中和能力的關鍵是病毒中和抗體檢測。傳統(tǒng)的空斑減少中和試驗(PRNT)耗時費力。基于假病毒系統(tǒng)的均相發(fā)光中和試驗已成為高通量替代方案。將表達熒光素酶的報告基因包裝進假病毒顆粒(攜帶目標病毒的囊膜蛋白)。當假病毒炎癥細胞時,會驅動熒光素酶表達。如果樣本中存在中和抗體,則會阻斷炎癥,導致熒光素酶信號下降。檢測時只需在炎癥后裂解細胞并加入發(fā)光底物,即可實現快速、定量、高通量的中和抗體滴度測定,在COVID-19等疫病中發(fā)揮了重要作用。均相化學發(fā)光,國家重點實驗室檢測平臺,領航醫(yī)療新時代!吉林體外診斷均相發(fā)光免疫分析li'ru進行均相發(fā)光檢測需要專門應用的多功能微孔板檢測儀。...
熒光共振能量轉移(FRET)是均相發(fā)光技術中應用比較多方面的信號產生機制之一。其原理是:當一個熒光基團(供體,Donor)的發(fā)射光譜與另一個熒光基團或淬滅基團(受體,Acceptor)的吸收光譜有足夠重疊,且兩者距離非常接近(通常1-10納米)時,供體的激發(fā)態(tài)能量會以非輻射方式轉移給受體。在均相檢測中,常將供體和受體分別標記在相互作用的生物分子對(如一對抗體、或酶與底物肽)上。當目標分子存在并促使這對生物分子結合時,供體與受體被拉近,發(fā)生有效的FRET,導致供體熒光淬滅,受體熒光增強(如果受體是熒光團)。通過監(jiān)測供體與受體熒光強度的比率變化,即可高靈敏度、高特異性地定量目標分析物。降本增效新方...
熒光共振能量轉移(FRET)是均相發(fā)光技術中應用比較多方面的信號產生機制之一。其原理是:當一個熒光基團(供體,Donor)的發(fā)射光譜與另一個熒光基團或淬滅基團(受體,Acceptor)的吸收光譜有足夠重疊,且兩者距離非常接近(通常1-10納米)時,供體的激發(fā)態(tài)能量會以非輻射方式轉移給受體。在均相檢測中,常將供體和受體分別標記在相互作用的生物分子對(如一對抗體、或酶與底物肽)上。當目標分子存在并促使這對生物分子結合時,供體與受體被拉近,發(fā)生有效的FRET,導致供體熒光淬滅,受體熒光增強(如果受體是熒光團)。通過監(jiān)測供體與受體熒光強度的比率變化,即可高靈敏度、高特異性地定量目標分析物。均相化學發(fā)光...
熱遷移分析(CETSA)用于研究藥物在細胞或組織水平與靶蛋白的結合,傳統(tǒng)方法依賴Western Blot,通量低。與均相化學發(fā)光免疫檢測(特別是Alpha技術)結合形成的CETSA HT,實現了高通量化。細胞經藥物處理和不同溫度加熱后裂解,針對目標蛋白的特異性抗體對(分別偶聯(lián)Alpha供體珠和受體珠)被加入裂解液。只有未因熱變性而沉淀的、保持天然構象的蛋白才能被兩個抗體同時識別并拉近微珠產生信號。通過繪制藥物處理組與對照組的熱穩(wěn)定性曲線,可以直觀看到藥物結合引起的蛋白熱穩(wěn)定性偏移(Tm變化),從而確認靶點結合并評估結合強度,廣泛應用于早期藥物發(fā)現中的靶點確證。均相化學發(fā)光在醫(yī)學中的作用和地位如...
在分子診斷領域,均相發(fā)光技術的應用遠不止于基礎的實時熒光定量PCR(qPCR)。它正推動該領域向著更高靈敏度、更強特異性和更便捷的操作模式演進。例如,在數字PCR(dPCR)這一定量技術中,雖然目前主流依賴熒光檢測,但基于化學發(fā)光的均相檢測方案正在探索中。其設想是將PCR反應體系分割成數萬個微滴后,利用化學發(fā)光探針(如基于魯米諾或吖啶酯的體系)進行檢測:在擴增陽性微滴中,探針被切割或構象改變觸發(fā)化學發(fā)光反應,通過計數發(fā)光的微滴數目即可實現核酸分子的定量。這種方法可能免除對復雜激發(fā)光學系統(tǒng)的依賴,并有望利用某些化學發(fā)光體系更高的信噪比特性,進一步提升對極低豐度靶標的檢出能力。均相化學發(fā)光在自身免...
在免疫學和學研究,常需同時監(jiān)測多個細胞因子或信號蛋白的磷酸化狀態(tài)。基于微珠的多重均相發(fā)光檢測系統(tǒng)(如Luminex xMAP技術結合化學發(fā)光檢測)應運而生。該系統(tǒng)使用不同顏色編碼的微球作為固相載體,每種微球包被一種特異性捕獲抗體。樣本中的多種靶標被各自捕獲后,再用生物素化檢測抗體和鏈霉親和素-熒光/發(fā)光報告分子進行檢測。雖然微球是固相,但整個反應在懸浮液中進行,讀數前無需洗滌,本質上也是一種高效的“液相”或“懸浮芯片”式多重均相檢測。均相化學發(fā)光在疾病早期篩查中能發(fā)揮怎樣的作用?吉林CRET技術均相發(fā)光廠家有哪些Alpha(Amplified Luminescent Proximity Hom...
Alpha技術,又稱均相臨近化學發(fā)光檢測,是均相發(fā)光領域的一項變革性突破。該技術基于兩種特殊的微珠:供體珠(Donor Bead)和受體珠(Acceptor Bead)。供體珠內包裹了光敏劑,當被680nm激光激發(fā)時,可將周圍環(huán)境中的氧氣轉化為高能態(tài)的單線態(tài)氧。單線態(tài)氧在溶液中擴散距離極短(約200納米)。只有當供體珠和受體珠因同時結合到一個目標分子(如抗原、蛋白互作對)上而彼此靠近時,單線態(tài)氧才能有效擴散至受體珠,觸發(fā)其內部的化學發(fā)光劑產生520-620nm的強光。若兩珠未靠近,單線態(tài)氧則淬滅在溶劑中。Alpha技術結合了臨近誘導的高特異性和化學發(fā)光的高靈敏度,且不受樣本顏色淬滅影響,在蛋白...
均相化學發(fā)光(Homogeneous Chemiluminescence)是將化學發(fā)光檢測技術與均相分析理念相結合的高階檢測范式。其關鍵在于,生物識別事件(如抗原-抗體結合、核酸雜交、酶-底物反應)在完全均勻的液相中發(fā)生,并通過與之偶聯(lián)的化學發(fā)光反應直接產生光信號,全程無需任何固相分離步驟(如洗滌、離心)。化學發(fā)光本身是通過化學反應(通常是氧化還原反應)產生激發(fā)態(tài)中間體,當其返回基態(tài)時釋放光子。將這一過程與均相分析結合,其價值在于實現了檢測的“加法原則”:只需按順序加入樣本和試劑,混合孵育后即可直接測量。這徹底消除了傳統(tǒng)異相分析中復雜的分離過程,使檢測流程得到變革性簡化,為生命科學研究和臨床診...
Alpha技術,又稱均相臨近化學發(fā)光檢測,是均相發(fā)光領域的一項變革性突破。該技術基于兩種特殊的微珠:供體珠(Donor Bead)和受體珠(Acceptor Bead)。供體珠內包裹了光敏劑,當被680nm激光激發(fā)時,可將周圍環(huán)境中的氧氣轉化為高能態(tài)的單線態(tài)氧。單線態(tài)氧在溶液中擴散距離極短(約200納米)。只有當供體珠和受體珠因同時結合到一個目標分子(如抗原、蛋白互作對)上而彼此靠近時,單線態(tài)氧才能有效擴散至受體珠,觸發(fā)其內部的化學發(fā)光劑產生520-620nm的強光。若兩珠未靠近,單線態(tài)氧則淬滅在溶劑中。Alpha技術結合了臨近誘導的高特異性和化學發(fā)光的高靈敏度,且不受樣本顏色淬滅影響,在蛋白...
相較于熒光或比色法,化學發(fā)光作為均相檢測的信號系統(tǒng)具有多重獨特優(yōu)勢。首先,它無需外部激發(fā)光源,從而完全避免了光源不穩(wěn)定、樣本自發(fā)熒光及光散射所帶來的背景干擾,理論上能獲得極高的信噪比和靈敏度。其次,化學發(fā)光反應產生的光子信號強度在一定范圍內與反應物濃度直接相關,動態(tài)范圍寬,可跨越數個數量級。再者,化學發(fā)光體系(如魯米諾、吖啶酯)的反應動力學多樣,可滿足從快速閃光到持久輝光的不同檢測需求。比較后,化學發(fā)光反應的啟動通常由單一試劑(如過氧化氫、堿)觸發(fā),易于控制,非常適合自動化儀器上的順序注射和即時讀數。這些特性使其成為實現超靈敏、高穩(wěn)健性均相檢測的理想信號輸出模式。均相化學發(fā)光的檢測速度如何,能...
在生物制藥(如單克隆抗體、重組蛋白)的生產過程中,均相發(fā)光技術被普遍用于工藝開發(fā)和質量控制。例如,使用基于Protein A或抗原的均相免疫分析,快速定量細胞培養(yǎng)上清或純化過程中的抗體滴度。也可以使用針對特定宿主細胞蛋白(HCP)或Protein A殘留的均相檢測方法,監(jiān)測純化工藝的去除效率。此外,對于抗體藥物的生物學活性(如ADCC、CDC效應),也有相應的基于細胞報告的均相發(fā)光檢測方法。這些應用幫助實現了生物工藝的快速優(yōu)化和產品質量的嚴格監(jiān)控。均相化學發(fā)光在自身免疫性疾病診斷中的作用大嗎?浙江干式化學發(fā)光均相發(fā)光廠家有哪些研究蛋白-蛋白相互作用(PPI)對于理解細胞信號網絡至關重要。傳統(tǒng)的...
適配體是通過SELEX技術篩選得到的單鏈DNA或RNA分子,能高親和力、高特異性結合靶標。將適配體與均相發(fā)光技術結合,產生了新型生物傳感器。例如,可以設計一個分子信標式適配體:其兩端分別標記熒光供體和淬滅基團,在沒有靶標時結構閉合,FRET發(fā)生,信號淬滅;結合靶標后構象打開,熒光恢復。或者,將適配體與發(fā)光酶(如熒光素酶)融合,靶標結合引起構象變化,從而活化或抑制酶活性。這類均相適配體傳感器在生物小分子、離子甚至細胞檢測中展現出巨大潛力。均相化學發(fā)光技術的未來發(fā)展趨勢是什么?湖南CRET技術均相發(fā)光的原理時間分辨熒光共振能量轉移(TR-FRET)是FRET技術的升級版,它結合了FRET的高空間分...
均相發(fā)光技術通過其“免分離”的關鍵設計理念,徹底變革了生物檢測的模式。從基礎的蛋白互作、酶活性分析,到復雜的細胞信號通路研究、高通量藥物篩選,再到臨床診斷和生物工藝監(jiān)控,其足跡已遍布生命科學和醫(yī)學的各個角落。以FRET、TR-FRET、Alpha、BRET等為表示的各種均相發(fā)光方法,提供了靈活、強大且多樣化的解決方案。它不只明顯提升了檢測效率和通量,降低了人力物力成本,更推動了科學發(fā)現和藥物研發(fā)的進程。隨著技術的不斷迭代和創(chuàng)新應用的拓展,均相發(fā)光必將在未來精確醫(yī)學和生物技術發(fā)展中持續(xù)扮演不可或缺的關鍵角色。均相化學發(fā)光新突破!凍干試劑來了,靈敏度更高,結果更準確!浙江化學發(fā)光均相發(fā)光優(yōu)點Alp...
盡管優(yōu)勢明顯,均相發(fā)光技術也存在一些挑戰(zhàn)和局限性。首先,某些技術(如FRET)可能受到樣本自身顏色(如血紅蛋白)、濁度或某些化合物(如具有強熒光或淬滅特性的藥物)的光學干擾。其次,均相檢測通常對試劑的特異性和純度要求極高,任何非特異性結合或聚集都可能導致假陽性信號。第三,開發(fā)均相檢測方法需要進行復雜的探針設計和標記優(yōu)化,前期開發(fā)成本較高。比較后,對于某些極低豐度的靶標,其靈敏度有時可能仍低于經過多步洗滌和信號放大的異相方法(如化學發(fā)光免疫分析CLIA)。均相發(fā)光試劑定制服務,根據您的需求提供個性化解決方案!北京化學發(fā)光均相發(fā)光免疫分析在傳染病診斷領域,均相化學發(fā)光技術主要用于開發(fā)高靈敏的抗原或...
除了基于熒光的能量轉移,均相檢測也可利用化學發(fā)光能量轉移(CRET)。在CRET中,供體是化學發(fā)光反應(如魯米諾-過氧化物酶反應)產生的激發(fā)態(tài)分子,其發(fā)出的光能直接激發(fā)鄰近的熒光受體發(fā)出更長波長的光。通過設計使受體標記在結合事件的另一方,即可實現均相檢測。電化學發(fā)光(ECL)也可用于均相模式。例如,將三聯(lián)吡啶釕標記在一方,另一方標記上能夠在其電極氧化還原循環(huán)中起共反應物作用的物質(如三丙胺)。當兩者因生物識別事件靠近時,電化學觸發(fā)的高效ECL反應得以發(fā)生,產生強信號。這些方法進一步拓展了均相發(fā)光的技術邊界,提供了更多樣化的信號輸出選擇。告別磁珠反應,均相化學發(fā)光,操作更簡便,實驗效率大幅提升!...
在分子診斷領域,均相發(fā)光技術的應用遠不止于基礎的實時熒光定量PCR(qPCR)。它正推動該領域向著更高靈敏度、更強特異性和更便捷的操作模式演進。例如,在數字PCR(dPCR)這一定量技術中,雖然目前主流依賴熒光檢測,但基于化學發(fā)光的均相檢測方案正在探索中。其設想是將PCR反應體系分割成數萬個微滴后,利用化學發(fā)光探針(如基于魯米諾或吖啶酯的體系)進行檢測:在擴增陽性微滴中,探針被切割或構象改變觸發(fā)化學發(fā)光反應,通過計數發(fā)光的微滴數目即可實現核酸分子的定量。這種方法可能免除對復雜激發(fā)光學系統(tǒng)的依賴,并有望利用某些化學發(fā)光體系更高的信噪比特性,進一步提升對極低豐度靶標的檢出能力。浦光生物均相化學發(fā)光...
熱遷移分析(Cellular Thermal Shift Assay, CETSA)是一種研究靶點與藥物在細胞水平結合情況的技術。其原理是藥物結合會改變靶蛋白的熱穩(wěn)定性。傳統(tǒng)的CETSA依賴蛋白質印跡法檢測,通量低。現在,通過與均相發(fā)光免疫檢測(如Alpha)結合,開發(fā)出了均相CETSA(簡稱CETSA? HT)。該方法將細胞在不同溫度下加熱后裂解,使用針對目標蛋白的抗體對(偶聯(lián)Alpha供體/受體珠)檢測溶液中剩余的未聚集的天然蛋白量。通過比較藥物處理組與對照組的蛋白熱穩(wěn)定性曲線偏移,即可高通量地確認化合物是否與細胞內靶點結合,并評估結合強度。均相化學發(fā)光與電化學發(fā)光相比,有什么不同?天津化...
適配體是通過體外篩選得到的單鏈DNA/RNA分子,能特異性結合小分子、蛋白質甚至細胞。將適配體的高特異性與均相化學發(fā)光的高靈敏度結合,催生了新型生物傳感器。設計策略包括:構象開關型:適配體與化學發(fā)光標記物(如吖啶酯)和淬滅基團相連,結合靶標后構象變化,改變發(fā)光效率。分裂型:將化學發(fā)光酶或催化其反應的組分分割,分別與分裂的適配體序列連接,靶標存在時適配體重組,恢復發(fā)光活性。鄰近連接型:兩個適配體分別結合靶標的不同部位,拉近其攜帶的化學發(fā)光反應組分(如供體/受體珠),觸發(fā)信號。這些傳感器在環(huán)境監(jiān)測、食品安全和生物標志物檢測中潛力巨大。均相化學發(fā)光技術的原理是什么,如何實現檢測?廣西技術升級均相發(fā)光...
相較于熒光或比色法,化學發(fā)光作為均相檢測的信號系統(tǒng)具有多重獨特優(yōu)勢。首先,它無需外部激發(fā)光源,從而完全避免了光源不穩(wěn)定、樣本自發(fā)熒光及光散射所帶來的背景干擾,理論上能獲得極高的信噪比和靈敏度。其次,化學發(fā)光反應產生的光子信號強度在一定范圍內與反應物濃度直接相關,動態(tài)范圍寬,可跨越數個數量級。再者,化學發(fā)光體系(如魯米諾、吖啶酯)的反應動力學多樣,可滿足從快速閃光到持久輝光的不同檢測需求。比較后,化學發(fā)光反應的啟動通常由單一試劑(如過氧化氫、堿)觸發(fā),易于控制,非常適合自動化儀器上的順序注射和即時讀數。這些特性使其成為實現超靈敏、高穩(wěn)健性均相檢測的理想信號輸出模式。均相化學發(fā)光在自身免疫性疾病診...
Alpha技術,又稱均相臨近化學發(fā)光檢測,是均相發(fā)光領域的一項變革性突破。該技術基于兩種特殊的微珠:供體珠(Donor Bead)和受體珠(Acceptor Bead)。供體珠內包裹了光敏劑,當被680nm激光激發(fā)時,可將周圍環(huán)境中的氧氣轉化為高能態(tài)的單線態(tài)氧。單線態(tài)氧在溶液中擴散距離極短(約200納米)。只有當供體珠和受體珠因同時結合到一個目標分子(如抗原、蛋白互作對)上而彼此靠近時,單線態(tài)氧才能有效擴散至受體珠,觸發(fā)其內部的化學發(fā)光劑產生520-620nm的強光。若兩珠未靠近,單線態(tài)氧則淬滅在溶劑中。Alpha技術結合了臨近誘導的高特異性和化學發(fā)光的高靈敏度,且不受樣本顏色淬滅影響,在蛋白...
從原理上深度對比均相與異相免疫分析,能清晰揭示均相技術的革新之處。異相分析法,以經典的酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)為表示,其檢測依賴于將捕獲抗體固定在固相載體(如微孔板)上,通過反復洗滌來分離“特異性結合”與“游離”的標記物,比較終通過底物顯色或發(fā)光來定量。這個過程繁瑣、耗時,且洗滌步驟容易導致結合物損失。而均相免疫分析則讓所有反應組分在溶液存。通過物理化學手段,使得只有當目標分子正確結合,形成特定復合物時,才能產生或改變發(fā)光信號。例如,在臨近誘導技術中,只有兩個標記有供體和受體的抗體同時結合一個抗原分子并彼此靠近時,能量轉移才能發(fā)生,從而報告陽性信號。所有未結合的標記物因其距離遠,不產生有...
化學發(fā)光共振能量轉移(CRET)是另一種重要的均相信號產生機制。它本質上是一種無需外部光激發(fā)的內源性FRET。在CRET中,供體是化學發(fā)光反應產生的激發(fā)態(tài)分子(如氧化的魯米諾或吖啶酯),其發(fā)射的光子能量直接傳遞給鄰近的熒光受體(如熒光染料、量子點或納米材料),促使受體發(fā)射出波長紅移的熒光。在均相檢測設計中,可將化學發(fā)光分子與受體分別標記在相互作用的生物分子對上。只有當目標分子存在并促使兩者結合時,供體與受體才能充分靠近,發(fā)生有效的CRET,產生特征性的受體熒光信號。通過檢測受體熒光,可以避免直接化學發(fā)光可能存在的背景干擾,并獲得更佳的光譜分辨能力,利于多重檢測。均相化學發(fā)光技術的檢測流程是怎樣...
相較于熒光或比色法,化學發(fā)光作為均相檢測的信號系統(tǒng)具有多重獨特優(yōu)勢。首先,它無需外部激發(fā)光源,從而完全避免了光源不穩(wěn)定、樣本自發(fā)熒光及光散射所帶來的背景干擾,理論上能獲得極高的信噪比和靈敏度。其次,化學發(fā)光反應產生的光子信號強度在一定范圍內與反應物濃度直接相關,動態(tài)范圍寬,可跨越數個數量級。再者,化學發(fā)光體系(如魯米諾、吖啶酯)的反應動力學多樣,可滿足從快速閃光到持久輝光的不同檢測需求。比較后,化學發(fā)光反應的啟動通常由單一試劑(如過氧化氫、堿)觸發(fā),易于控制,非常適合自動化儀器上的順序注射和即時讀數。這些特性使其成為實現超靈敏、高穩(wěn)健性均相檢測的理想信號輸出模式。體外診斷新機遇!均相發(fā)光新產品...
Alpha(Amplified Luminescent Proximity Homogeneous Assay)技術是均相化學發(fā)光的典范。其供體珠中裝載光敏劑,在680nm激光激發(fā)下,將周圍環(huán)境中的氧分子轉化為高能量、短壽命(約4微秒)的單線態(tài)氧。單線態(tài)氧在溶液中的擴散半徑只約200納米。受體珠中則裝載了化學發(fā)光劑(通常是噻吩衍生物)和熒光接收體。當單線態(tài)氧擴散進入鄰近的受體珠,會觸發(fā)一系列級聯(lián)反應:化學發(fā)光劑被氧化并發(fā)光,該能量隨即傳遞給熒光接收體,比較終發(fā)射出波長更長(520-620nm)、特征更明顯的熒光。這個能量轉移和放大的過程,使得一個單線態(tài)氧分子能引發(fā)大量發(fā)光分子的發(fā)射,實現了信號...
在藥物安全性評價早期,評估化合物的遺傳毒性至關重要。傳統(tǒng)的細菌回復突變試驗(Ames試驗)周期較長。一些基于哺乳動物細胞的均相化學發(fā)光遺傳毒性篩選方法被開發(fā)出來。例如,使用工程細胞系,其中DNA損傷響應元件(如p53響應元件)調控著熒光素酶報告基因的表達。當化合物引起DNA損傷時,會活化報告基因,產生化學發(fā)光信號。這類方法能在幾天內完成對大量化合物的初步遺傳毒性風險評估,作為Ames試驗的高通量預篩選工具,有助于早期淘汰有風險的候選分子,節(jié)約研發(fā)成本。與傳統(tǒng)化學發(fā)光技術相比,均相化學發(fā)光的優(yōu)勢體現在?廣東第五代化學發(fā)光均相發(fā)光應用領域單核苷酸多態(tài)性(SNP)分型和DNA甲基化分析是個體化醫(yī)療和...
生物發(fā)光共振能量轉移(BRET)是一種天然的或工程化的均相檢測技術。它利用生物發(fā)光蛋白(如海腎熒光素酶Rluc)作為供體,催化底物(如腔腸素)產生化學發(fā)光,該能量直接轉移給鄰近的熒光蛋白(如GFP、YFP)受體,使其發(fā)出熒光。BRET無需外部光源激發(fā),完全消除了光散射和自發(fā)熒光的背景,信噪比極高。在活細胞研究中,可將Rluc和熒光蛋白分別與兩個可能相互作用的靶蛋白融合,通過監(jiān)測BRET信號來實時、動態(tài)地研究蛋白互作的空間接近性和動力學,是研究GPCR二聚化、信號轉導復合物組裝的強大工具。均相化學發(fā)光與電化學發(fā)光相比,有什么不同?均相化學發(fā)光均相發(fā)光優(yōu)點li'ru進行均相發(fā)光檢測需要專門應用的多...