均相發(fā)光技術(shù)通過其“免分離”的關(guān)鍵設(shè)計(jì)理念,徹底變革了生物檢測(cè)的模式。從基礎(chǔ)的蛋白互作、酶活性分析,到復(fù)雜的細(xì)胞信號(hào)通路研究、高通量藥物篩選,再到臨床診斷和生物工藝監(jiān)控,其足跡已遍布生命科學(xué)和醫(yī)學(xué)的各個(gè)角落。以FRET、TR-FRET、Alpha、BRET等為表示的各種均相發(fā)光方法,提供了靈活、強(qiáng)大且多樣化的解決方案。它不只明顯提升了檢測(cè)效率和通量,降低了人力物力成本,更推動(dòng)了科學(xué)發(fā)現(xiàn)和藥物研發(fā)的進(jìn)程。隨著技術(shù)的不斷迭代和創(chuàng)新應(yīng)用的拓展,均相發(fā)光必將在未來精確醫(yī)學(xué)和生物技術(shù)發(fā)展中持續(xù)扮演不可或缺的關(guān)鍵角色。均相化學(xué)發(fā)光技術(shù)怎樣提高檢測(cè)的靈敏度和特異性?浙江體外診斷均相發(fā)光單核苷酸多態(tài)性(SNP...
干細(xì)胞的多能性維持、定向分化及其功能評(píng)估,需要可靠的檢測(cè)方法。均相化學(xué)發(fā)光技術(shù)可用于:多能性標(biāo)記物檢測(cè):通過均相免疫分析定量細(xì)胞裂解物中OCT4、SOX2、NANOG等蛋白的水平。報(bào)告基因細(xì)胞系構(gòu)建:將多能性特異性或分化特異性啟動(dòng)子與熒光素酶基因連接,通過檢測(cè)化學(xué)發(fā)光信號(hào)來無損、實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)干細(xì)胞狀態(tài)變化,用于篩選維持干性或誘導(dǎo)分化的因子。分化細(xì)胞功能評(píng)估:如心肌細(xì)胞分化后,可通過鈣離子敏感的化學(xué)發(fā)光染料檢測(cè)其自發(fā)搏動(dòng)引起的鈣瞬變,評(píng)估功能成熟度。這些方法為干細(xì)胞質(zhì)量控制和研究提供了有力工具。均相化學(xué)發(fā)光技術(shù)的研發(fā)難點(diǎn)有哪些,如何攻克?福建均相發(fā)光技術(shù)適配體是通過SELEX技術(shù)篩選得到的單鏈DNA...
在藥物安全性評(píng)價(jià)早期,評(píng)估化合物的遺傳毒性至關(guān)重要。傳統(tǒng)的細(xì)菌回復(fù)突變?cè)囼?yàn)(Ames試驗(yàn))周期較長(zhǎng)。一些基于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的均相化學(xué)發(fā)光遺傳毒性篩選方法被開發(fā)出來。例如,使用工程細(xì)胞系,其中DNA損傷響應(yīng)元件(如p53響應(yīng)元件)調(diào)控著熒光素酶報(bào)告基因的表達(dá)。當(dāng)化合物引起DNA損傷時(shí),會(huì)活化報(bào)告基因,產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光信號(hào)。這類方法能在幾天內(nèi)完成對(duì)大量化合物的初步遺傳毒性風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估,作為Ames試驗(yàn)的高通量預(yù)篩選工具,有助于早期淘汰有風(fēng)險(xiǎn)的候選分子,節(jié)約研發(fā)成本。醫(yī)療新時(shí)代!均相發(fā)光,助力疾病早篩早診!浙江浦光生物均相發(fā)光技術(shù)均相發(fā)光技術(shù)比較明顯的優(yōu)勢(shì)是其操作的極度簡(jiǎn)便性所帶來的高通量檢測(cè)能力。由于摒棄了...
熱遷移分析(CETSA)用于研究藥物在細(xì)胞或組織水平與靶蛋白的結(jié)合,傳統(tǒng)方法依賴Western Blot,通量低。與均相化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)(特別是Alpha技術(shù))結(jié)合形成的CETSA HT,實(shí)現(xiàn)了高通量化。細(xì)胞經(jīng)藥物處理和不同溫度加熱后裂解,針對(duì)目標(biāo)蛋白的特異性抗體對(duì)(分別偶聯(lián)Alpha供體珠和受體珠)被加入裂解液。只有未因熱變性而沉淀的、保持天然構(gòu)象的蛋白才能被兩個(gè)抗體同時(shí)識(shí)別并拉近微珠產(chǎn)生信號(hào)。通過繪制藥物處理組與對(duì)照組的熱穩(wěn)定性曲線,可以直觀看到藥物結(jié)合引起的蛋白熱穩(wěn)定性偏移(Tm變化),從而確認(rèn)靶點(diǎn)結(jié)合并評(píng)估結(jié)合強(qiáng)度,廣泛應(yīng)用于早期藥物發(fā)現(xiàn)中的靶點(diǎn)確證。降本增效新方案,為您節(jié)省實(shí)驗(yàn)成本!...
研究細(xì)胞內(nèi)信號(hào)通路的動(dòng)態(tài)變化,需要能在細(xì)胞裂解液甚至活細(xì)胞背景下進(jìn)行快速、多通路的分析。均相化學(xué)發(fā)光技術(shù)完美契合這一需求。例如,使用基于Alpha或類似技術(shù)的磷酸化特異性免疫檢測(cè),可以在同一塊板中,從細(xì)胞裂解液中直接定量多種信號(hào)蛋白(如Akt、ERK、STAT)在不同刺激條件下的磷酸化水平。整個(gè)過程無需Western Blot的凝膠電泳、轉(zhuǎn)膜和繁瑣的封閉孵育洗滌步驟,通量提高數(shù)百倍,且能實(shí)現(xiàn)精確定量。此外,基于化學(xué)發(fā)光的報(bào)告基因檢測(cè)(如熒光素酶)也被普遍用于監(jiān)測(cè)特定信號(hào)通路(如Wnt、Hedgehog、NF-κB)的轉(zhuǎn)錄活性,用于功能性篩選和機(jī)理研究。均相化學(xué)發(fā)光在體外診斷領(lǐng)域的應(yīng)用范圍有多廣...
從原理上深度對(duì)比均相與異相免疫分析,能清晰揭示均相技術(shù)的革新之處。異相分析法,以經(jīng)典的酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)為表示,其檢測(cè)依賴于將捕獲抗體固定在固相載體(如微孔板)上,通過反復(fù)洗滌來分離“特異性結(jié)合”與“游離”的標(biāo)記物,比較終通過底物顯色或發(fā)光來定量。這個(gè)過程繁瑣、耗時(shí),且洗滌步驟容易導(dǎo)致結(jié)合物損失。而均相免疫分析則讓所有反應(yīng)組分在溶液存。通過物理化學(xué)手段,使得只有當(dāng)目標(biāo)分子正確結(jié)合,形成特定復(fù)合物時(shí),才能產(chǎn)生或改變發(fā)光信號(hào)。例如,在臨近誘導(dǎo)技術(shù)中,只有兩個(gè)標(biāo)記有供體和受體的抗體同時(shí)結(jié)合一個(gè)抗原分子并彼此靠近時(shí),能量轉(zhuǎn)移才能發(fā)生,從而報(bào)告陽(yáng)性信號(hào)。所有未結(jié)合的標(biāo)記物因其距離遠(yuǎn),不產(chǎn)生有...
在臨床診斷和生物研究中,經(jīng)常需要同時(shí)檢測(cè)一個(gè)樣本中的多個(gè)指標(biāo)。均相發(fā)光技術(shù)可以通過多種策略實(shí)現(xiàn)多重分析。空間編碼:在不同的微孔或區(qū)域進(jìn)行不同檢測(cè)。光譜編碼:使用發(fā)射不同波長(zhǎng)熒光的多種受體(如不同鑭系元素供體搭配不同顏色受體),通過檢測(cè)不同波長(zhǎng)通道的信號(hào)來區(qū)分不同靶標(biāo)。時(shí)間編碼:利用具有不同熒光壽命的供體。Alpha技術(shù)中也可以使用發(fā)射不同波長(zhǎng)熒光的受體珠。這些多重均相檢測(cè)方案能夠在單次反應(yīng)中獲取更多信息,節(jié)省樣本和試劑,提高檢測(cè)效率。臨床檢測(cè)新利器!肝素結(jié)合蛋白(HBP)檢測(cè)試劑盒(均相化學(xué)發(fā)光法),為醫(yī)療保駕護(hù)航!北京第五代化學(xué)發(fā)光均相發(fā)光廠家有哪些均相發(fā)光是一種先進(jìn)的生物化學(xué)檢測(cè)技術(shù),其關(guān)...
GPCR是比較大的藥物靶點(diǎn)家族,其功能研究涉及配體結(jié)合、第二信使產(chǎn)生、下游信號(hào)通路活化等多個(gè)層面。均相發(fā)光技術(shù)多方面滲透于此領(lǐng)域。對(duì)于配體結(jié)合競(jìng)爭(zhēng)實(shí)驗(yàn),可采用TR-FRET,將受體標(biāo)記供體,配體標(biāo)記受體。對(duì)于GPCR活化后比較關(guān)鍵的cAMP積累或IP3/DAG產(chǎn)生,均有成熟的均相檢測(cè)試劑盒。例如,cAMP檢測(cè)常采用基于抗體競(jìng)爭(zhēng)原理的均相發(fā)光免疫分析。細(xì)胞裂解后,內(nèi)源性cAMP與加入的標(biāo)記cAMP競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合有限量的抗cAMP抗體。抗體結(jié)合事件通過FRET或Alpha技術(shù)被檢測(cè),信號(hào)強(qiáng)度與內(nèi)源性cAMP濃度成反比。這類方法直接在細(xì)胞裂解液中進(jìn)行,快速、靈敏,完美契合GPCR激動(dòng)劑/拮抗劑的高通量篩選...
干細(xì)胞的多能性維持、定向分化及其功能評(píng)估,需要可靠的檢測(cè)方法。均相化學(xué)發(fā)光技術(shù)可用于:多能性標(biāo)記物檢測(cè):通過均相免疫分析定量細(xì)胞裂解物中OCT4、SOX2、NANOG等蛋白的水平。報(bào)告基因細(xì)胞系構(gòu)建:將多能性特異性或分化特異性啟動(dòng)子與熒光素酶基因連接,通過檢測(cè)化學(xué)發(fā)光信號(hào)來無損、實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)干細(xì)胞狀態(tài)變化,用于篩選維持干性或誘導(dǎo)分化的因子。分化細(xì)胞功能評(píng)估:如心肌細(xì)胞分化后,可通過鈣離子敏感的化學(xué)發(fā)光染料檢測(cè)其自發(fā)搏動(dòng)引起的鈣瞬變,評(píng)估功能成熟度。這些方法為干細(xì)胞質(zhì)量控制和研究提供了有力工具。均相化學(xué)發(fā)光的反應(yīng)機(jī)制是怎樣的,有哪些關(guān)鍵步驟?遼寧浦光生物均相發(fā)光相較于熒光或比色法,化學(xué)發(fā)光作為均相檢...
在重癥炎癥(如膿毒癥)、CAR-T診療或某些自身免疫病中,細(xì)胞因子風(fēng)暴是危及生命的狀態(tài),需要快速監(jiān)測(cè)多種炎癥因子。基于微球陣列的均相化學(xué)發(fā)光多重檢測(cè)技術(shù),能夠從單份微量血清或血漿樣本中,同時(shí)定量檢測(cè)IL-6、IL-1β、TNF-α、IFN-γ等十幾種關(guān)鍵細(xì)胞因子的濃度。這種高通量、多參數(shù)的分析能力,使得臨床醫(yī)生或研究人員能夠多方面、快速地掌握患者的炎癥風(fēng)暴譜系,評(píng)估嚴(yán)重程度,并監(jiān)測(cè)診療干預(yù)(如抗細(xì)胞因子抗體)的效果,為精細(xì)免疫調(diào)控提供依據(jù)。均相化學(xué)發(fā)光技術(shù)的檢測(cè)流程是怎樣的,復(fù)雜嗎?安徽技術(shù)升級(jí)均相發(fā)光免疫診斷試劑報(bào)告基因(如熒光素酶、β-半乳糖苷酶)是研究基因表達(dá)調(diào)控的常用工具。傳統(tǒng)的報(bào)告基...
熱遷移分析(Cellular Thermal Shift Assay, CETSA)是一種研究靶點(diǎn)與藥物在細(xì)胞水平結(jié)合情況的技術(shù)。其原理是藥物結(jié)合會(huì)改變靶蛋白的熱穩(wěn)定性。傳統(tǒng)的CETSA依賴蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè),通量低。現(xiàn)在,通過與均相發(fā)光免疫檢測(cè)(如Alpha)結(jié)合,開發(fā)出了均相CETSA(簡(jiǎn)稱CETSA? HT)。該方法將細(xì)胞在不同溫度下加熱后裂解,使用針對(duì)目標(biāo)蛋白的抗體對(duì)(偶聯(lián)Alpha供體/受體珠)檢測(cè)溶液中剩余的未聚集的天然蛋白量。通過比較藥物處理組與對(duì)照組的蛋白熱穩(wěn)定性曲線偏移,即可高通量地確認(rèn)化合物是否與細(xì)胞內(nèi)靶點(diǎn)結(jié)合,并評(píng)估結(jié)合強(qiáng)度。均相化學(xué)發(fā)光與熒光免疫技術(shù)相比,優(yōu)勢(shì)在哪?安徽診...
離子通道和轉(zhuǎn)運(yùn)體是重要的藥物靶點(diǎn),但傳統(tǒng)電生理方法通量極低。基于化學(xué)發(fā)光的離子敏炎癥料或蛋白,為高通量篩選提供了可能。例如,使用對(duì)鈣離子敏感的水母發(fā)光蛋白(Aequorin)或基于熒光素酶的鈣指示劑(如Photina)。當(dāng)離子通道開放引起離子內(nèi)流時(shí),會(huì)觸發(fā)這些蛋白的化學(xué)發(fā)光反應(yīng)。將穩(wěn)定表達(dá)該報(bào)告系統(tǒng)和目標(biāo)離子通道的細(xì)胞系用于篩選,加入化合物后直接測(cè)量發(fā)光信號(hào)變化,即可高通量地發(fā)現(xiàn)通道的激動(dòng)劑或阻斷劑。類似原理也可用于鈉、鉀等離子通道或某些轉(zhuǎn)運(yùn)體的功能研究。鐵蛋白(Ferr)檢測(cè)試劑盒(均相化學(xué)發(fā)光法)。黑龍江干式化學(xué)發(fā)光均相發(fā)光的原理激酶是重要的藥物靶點(diǎn),其活性檢測(cè)是藥物篩選的關(guān)鍵。均相發(fā)光技...
在傳染病診斷領(lǐng)域,均相化學(xué)發(fā)光技術(shù)主要用于開發(fā)高靈敏的抗原或抗體檢測(cè)方法。例如,針對(duì)病毒抗原,可以設(shè)計(jì)雙抗體夾心法的Alpha檢測(cè),實(shí)現(xiàn)快速、高靈敏的定量。在病毒學(xué)基礎(chǔ)研究中,其應(yīng)用更為普遍:假病毒中和試驗(yàn)(檢測(cè)熒光素酶報(bào)告基因信號(hào)以評(píng)估抗體中和能力)、病毒進(jìn)入抑制篩選、病毒復(fù)制周期關(guān)鍵酶(如蛋白酶、聚合酶)抑制劑篩選等。特別是在COVID-19大流行期間,基于均相化學(xué)發(fā)光原理的高通量中和抗體檢測(cè)平臺(tái),為疫苗評(píng)價(jià)和康復(fù)者血漿篩查提供了關(guān)鍵工具。均相化學(xué)發(fā)光的信號(hào)放大機(jī)制是怎樣的?浦光生物均相發(fā)光技術(shù)均相化學(xué)發(fā)光(Homogeneous Chemiluminescence)是將化學(xué)發(fā)光檢測(cè)技術(shù)與...
除了基于熒光的能量轉(zhuǎn)移,均相檢測(cè)也可利用化學(xué)發(fā)光能量轉(zhuǎn)移(CRET)。在CRET中,供體是化學(xué)發(fā)光反應(yīng)(如魯米諾-過氧化物酶反應(yīng))產(chǎn)生的激發(fā)態(tài)分子,其發(fā)出的光能直接激發(fā)鄰近的熒光受體發(fā)出更長(zhǎng)波長(zhǎng)的光。通過設(shè)計(jì)使受體標(biāo)記在結(jié)合事件的另一方,即可實(shí)現(xiàn)均相檢測(cè)。電化學(xué)發(fā)光(ECL)也可用于均相模式。例如,將三聯(lián)吡啶釕標(biāo)記在一方,另一方標(biāo)記上能夠在其電極氧化還原循環(huán)中起共反應(yīng)物作用的物質(zhì)(如三丙胺)。當(dāng)兩者因生物識(shí)別事件靠近時(shí),電化學(xué)觸發(fā)的高效ECL反應(yīng)得以發(fā)生,產(chǎn)生強(qiáng)信號(hào)。這些方法進(jìn)一步拓展了均相發(fā)光的技術(shù)邊界,提供了更多樣化的信號(hào)輸出選擇。均相發(fā)光技術(shù)研究進(jìn)展,浦光生物為您提供前沿資訊!安徽CRE...
細(xì)胞水平的功能性檢測(cè)是藥物篩選和生物學(xué)研究的基礎(chǔ)。均相化學(xué)發(fā)光為此提供了多種穩(wěn)健的檢測(cè)方案。比較經(jīng)典的是基于ATP含量的細(xì)胞活力/增殖/毒性檢測(cè)。活細(xì)胞內(nèi)的ATP與熒光素酶-熒光素反應(yīng)直接偶聯(lián),產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光信號(hào),其強(qiáng)度與活細(xì)胞數(shù)成正比。該方法操作簡(jiǎn)單(一步加樣裂解/檢測(cè)),靈敏度高,線性范圍寬。此外,針對(duì)細(xì)胞凋亡,可通過檢測(cè)Caspase酶活性(使用化學(xué)發(fā)光的Caspase底物)或膜磷脂酰絲氨酸外露(使用與化學(xué)發(fā)光檢測(cè)偶聯(lián)的Annexin V類似物)來進(jìn)行均相分析。這些方法均實(shí)現(xiàn)了在微孔板中對(duì)細(xì)胞狀態(tài)的快速、定量評(píng)估。創(chuàng)新驅(qū)動(dòng)未來!均相化學(xué)發(fā)光創(chuàng)新產(chǎn)品引導(dǎo)體外診斷新潮流!化學(xué)發(fā)光均相發(fā)光解決方...
均相發(fā)光是一種先進(jìn)的生物化學(xué)檢測(cè)技術(shù),其關(guān)鍵特征在于整個(gè)檢測(cè)反應(yīng)過程均在均一的液相中進(jìn)行,無需任何固相分離步驟(如洗滌、離心)。 它通過巧妙的設(shè)計(jì),將待測(cè)物的特異性識(shí)別事件(如抗原-抗體結(jié)合、酶-底物反應(yīng))直接轉(zhuǎn)化為可檢測(cè)的光信號(hào)。 實(shí)現(xiàn)這一目標(biāo)的關(guān)鍵在于依賴能量轉(zhuǎn)移、空間位阻改變或化學(xué)環(huán)境變化等機(jī)制,使信號(hào)分子(供體)與淬滅分子(受體)或發(fā)光底物在結(jié)合事件發(fā)生前后,其相互作用效率發(fā)生明顯改變,從而導(dǎo)致發(fā)光信號(hào)的增強(qiáng)或猝滅。與傳統(tǒng)的異相免疫分析(如ELISA)相比,均相發(fā)光技術(shù)具有操作簡(jiǎn)便、通量高、易于自動(dòng)化、試劑消耗少、檢測(cè)速度快等突出優(yōu)點(diǎn),極大地推動(dòng)了高通量藥物篩選、臨床診斷和基礎(chǔ)生命科學(xué)...
在免疫學(xué)和學(xué)研究,常需同時(shí)監(jiān)測(cè)多個(gè)細(xì)胞因子或信號(hào)蛋白的磷酸化狀態(tài)。基于微珠的多重均相發(fā)光檢測(cè)系統(tǒng)(如Luminex xMAP技術(shù)結(jié)合化學(xué)發(fā)光檢測(cè))應(yīng)運(yùn)而生。該系統(tǒng)使用不同顏色編碼的微球作為固相載體,每種微球包被一種特異性捕獲抗體。樣本中的多種靶標(biāo)被各自捕獲后,再用生物素化檢測(cè)抗體和鏈霉親和素-熒光/發(fā)光報(bào)告分子進(jìn)行檢測(cè)。雖然微球是固相,但整個(gè)反應(yīng)在懸浮液中進(jìn)行,讀數(shù)前無需洗滌,本質(zhì)上也是一種高效的“液相”或“懸浮芯片”式多重均相檢測(cè)。告別繁瑣操作,均相化學(xué)發(fā)光來了!河南浦光生物均相發(fā)光優(yōu)點(diǎn)評(píng)估疫苗免疫效果或康復(fù)者血清中和能力的關(guān)鍵是病毒中和抗體檢測(cè)。傳統(tǒng)的空斑減少中和試驗(yàn)(PRNT)耗時(shí)費(fèi)力。...
盡管優(yōu)勢(shì)明顯,均相發(fā)光技術(shù)也存在一些挑戰(zhàn)和局限性。首先,某些技術(shù)(如FRET)可能受到樣本自身顏色(如血紅蛋白)、濁度或某些化合物(如具有強(qiáng)熒光或淬滅特性的藥物)的光學(xué)干擾。其次,均相檢測(cè)通常對(duì)試劑的特異性和純度要求極高,任何非特異性結(jié)合或聚集都可能導(dǎo)致假陽(yáng)性信號(hào)。第三,開發(fā)均相檢測(cè)方法需要進(jìn)行復(fù)雜的探針設(shè)計(jì)和標(biāo)記優(yōu)化,前期開發(fā)成本較高。比較后,對(duì)于某些極低豐度的靶標(biāo),其靈敏度有時(shí)可能仍低于經(jīng)過多步洗滌和信號(hào)放大的異相方法(如化學(xué)發(fā)光免疫分析CLIA)。均相化學(xué)發(fā)光技術(shù)在臨床檢驗(yàn)中的普及程度。湖南CRET技術(shù)均相發(fā)光應(yīng)用領(lǐng)域在分子診斷領(lǐng)域,均相發(fā)光技術(shù)的應(yīng)用遠(yuǎn)不止于基礎(chǔ)的實(shí)時(shí)熒光定量PCR(q...
均相發(fā)光技術(shù)比較明顯的優(yōu)勢(shì)是其操作的極度簡(jiǎn)便性所帶來的高通量檢測(cè)能力。由于摒棄了所有分離步驟,典型的均相發(fā)光檢測(cè)只需將樣本、識(shí)別元件(如抗體)和發(fā)光試劑依次加入微孔板中,混合孵育后即可直接讀數(shù)。這種“加樣-孵育-檢測(cè)”的模式,將復(fù)雜的多步流程簡(jiǎn)化為一步或兩步,不僅大幅縮短了檢測(cè)時(shí)間(通常可在幾分鐘到一小時(shí)內(nèi)完成),還大限度地減少了人為操作誤差和交叉污染的風(fēng)險(xiǎn)。這一特性使其完美適配現(xiàn)代自動(dòng)化液體處理系統(tǒng)和多通道檢測(cè)儀,能夠輕松實(shí)現(xiàn)每天處理數(shù)萬(wàn)甚至數(shù)十萬(wàn)個(gè)樣本的超高通量篩選,在藥物發(fā)現(xiàn)、功能基因組學(xué)等需要海量數(shù)據(jù)積累的領(lǐng)域具有不可替代的價(jià)值。醫(yī)療新時(shí)代!均相發(fā)光,助力疾病早篩早診!安徽CRET技術(shù)...
傳統(tǒng)的化學(xué)發(fā)光免疫分析(CLIA)多為異相,需要固相包被和洗滌。均相化學(xué)發(fā)光免疫分析則通過精巧設(shè)計(jì)免除了這些步驟。一種常見策略是使用空間位阻或能量轉(zhuǎn)移淬滅。例如,將化學(xué)發(fā)光標(biāo)記物(如吖啶酯)標(biāo)記在一種抗體上,將淬滅劑或另一種能淬滅其活性的物質(zhì)標(biāo)記在競(jìng)爭(zhēng)抗原或另一種抗體上。在未結(jié)合狀態(tài)下,兩者靠近,化學(xué)發(fā)光被淬滅或無法有效觸發(fā)。當(dāng)樣本中的目標(biāo)抗原與體系競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合,解除了這種淬滅效應(yīng),化學(xué)發(fā)光信號(hào)得以恢復(fù)。另一種策略是利用酶片段互補(bǔ):將化學(xué)發(fā)光酶(如熒光素酶)分割成無活性的兩個(gè)片段,分別標(biāo)記在相互作用的分子對(duì)上,結(jié)合后酶活性恢復(fù),催化底物發(fā)光。這些設(shè)計(jì)實(shí)現(xiàn)了在復(fù)雜樣本中直接進(jìn)行免疫定量。臨床檢測(cè)新利...
li'ru進(jìn)行均相發(fā)光檢測(cè)需要專門應(yīng)用的多功能微孔板檢測(cè)儀。這類儀器通常集成了多種功能,例如:能夠提供特定波長(zhǎng)的光激發(fā)(用于熒光、TR-FRET),或具備注射器以添加化學(xué)發(fā)光/電化學(xué)發(fā)光觸發(fā)試劑;比較關(guān)鍵的是,擁有高靈敏度的光電倍增管(PMT)或CCD檢測(cè)器來捕獲微弱的光信號(hào)。先進(jìn)的儀器還具備溫控功能,并能同時(shí)或依次進(jìn)行不同模式的檢測(cè)(如熒光強(qiáng)度、時(shí)間分辨熒光、化學(xué)發(fā)光)。儀器的性能直接決定了檢測(cè)的靈敏度、動(dòng)態(tài)范圍和通量。告別繁瑣操作,均相化學(xué)發(fā)光來了!吉林第五代化學(xué)發(fā)光均相發(fā)光與普通發(fā)光的區(qū)別盡管優(yōu)勢(shì)明顯,均相發(fā)光技術(shù)也存在一些挑戰(zhàn)和局限性。首先,某些技術(shù)(如FRET)可能受到樣本自身顏色(...
干細(xì)胞的多能性維持、定向分化及其功能評(píng)估,需要可靠的檢測(cè)方法。均相化學(xué)發(fā)光技術(shù)可用于:多能性標(biāo)記物檢測(cè):通過均相免疫分析定量細(xì)胞裂解物中OCT4、SOX2、NANOG等蛋白的水平。報(bào)告基因細(xì)胞系構(gòu)建:將多能性特異性或分化特異性啟動(dòng)子與熒光素酶基因連接,通過檢測(cè)化學(xué)發(fā)光信號(hào)來無損、實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)干細(xì)胞狀態(tài)變化,用于篩選維持干性或誘導(dǎo)分化的因子。分化細(xì)胞功能評(píng)估:如心肌細(xì)胞分化后,可通過鈣離子敏感的化學(xué)發(fā)光染料檢測(cè)其自發(fā)搏動(dòng)引起的鈣瞬變,評(píng)估功能成熟度。這些方法為干細(xì)胞質(zhì)量控制和研究提供了有力工具。均相化學(xué)發(fā)光在傳染病診斷中的應(yīng)用效果如何?湖南均相化學(xué)發(fā)光均相發(fā)光免疫分析均相發(fā)光技術(shù)通過其“免分離”的關(guān)...
在臨床診斷和生物研究中,經(jīng)常需要同時(shí)檢測(cè)一個(gè)樣本中的多個(gè)指標(biāo)。均相發(fā)光技術(shù)可以通過多種策略實(shí)現(xiàn)多重分析。空間編碼:在不同的微孔或區(qū)域進(jìn)行不同檢測(cè)。光譜編碼:使用發(fā)射不同波長(zhǎng)熒光的多種受體(如不同鑭系元素供體搭配不同顏色受體),通過檢測(cè)不同波長(zhǎng)通道的信號(hào)來區(qū)分不同靶標(biāo)。時(shí)間編碼:利用具有不同熒光壽命的供體。Alpha技術(shù)中也可以使用發(fā)射不同波長(zhǎng)熒光的受體珠。這些多重均相檢測(cè)方案能夠在單次反應(yīng)中獲取更多信息,節(jié)省樣本和試劑,提高檢測(cè)效率。均相化學(xué)發(fā)光在體外診斷領(lǐng)域的應(yīng)用范圍有多廣?廣東CRET技術(shù)均相發(fā)光技術(shù)離子通道和轉(zhuǎn)運(yùn)體是重要的藥物靶點(diǎn),但傳統(tǒng)電生理方法通量極低。基于化學(xué)發(fā)光的離子敏炎癥料或蛋...
盡管優(yōu)勢(shì)明顯,均相發(fā)光技術(shù)也存在一些挑戰(zhàn)和局限性。首先,某些技術(shù)(如FRET)可能受到樣本自身顏色(如血紅蛋白)、濁度或某些化合物(如具有強(qiáng)熒光或淬滅特性的藥物)的光學(xué)干擾。其次,均相檢測(cè)通常對(duì)試劑的特異性和純度要求極高,任何非特異性結(jié)合或聚集都可能導(dǎo)致假陽(yáng)性信號(hào)。第三,開發(fā)均相檢測(cè)方法需要進(jìn)行復(fù)雜的探針設(shè)計(jì)和標(biāo)記優(yōu)化,前期開發(fā)成本較高。比較后,對(duì)于某些極低豐度的靶標(biāo),其靈敏度有時(shí)可能仍低于經(jīng)過多步洗滌和信號(hào)放大的異相方法(如化學(xué)發(fā)光免疫分析CLIA)。與傳統(tǒng)化學(xué)發(fā)光技術(shù)相比,均相化學(xué)發(fā)光的優(yōu)勢(shì)體現(xiàn)在?廣西第五代化學(xué)發(fā)光均相發(fā)光免疫分析環(huán)境水樣和食品中的微量污染物(如農(nóng)藥殘留、獸藥、、重金屬離...
在藥物安全性評(píng)價(jià)早期,評(píng)估化合物的遺傳毒性至關(guān)重要。傳統(tǒng)的細(xì)菌回復(fù)突變?cè)囼?yàn)(Ames試驗(yàn))周期較長(zhǎng)。一些基于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的均相化學(xué)發(fā)光遺傳毒性篩選方法被開發(fā)出來。例如,使用工程細(xì)胞系,其中DNA損傷響應(yīng)元件(如p53響應(yīng)元件)調(diào)控著熒光素酶報(bào)告基因的表達(dá)。當(dāng)化合物引起DNA損傷時(shí),會(huì)活化報(bào)告基因,產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光信號(hào)。這類方法能在幾天內(nèi)完成對(duì)大量化合物的初步遺傳毒性風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估,作為Ames試驗(yàn)的高通量預(yù)篩選工具,有助于早期淘汰有風(fēng)險(xiǎn)的候選分子,節(jié)約研發(fā)成本。均相化學(xué)發(fā)光,國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)平臺(tái),領(lǐng)航醫(yī)療新時(shí)代!浙江體外診斷均相發(fā)光與普通發(fā)光的區(qū)別盡管優(yōu)勢(shì)明顯,均相發(fā)光技術(shù)也存在一些挑戰(zhàn)和局限性。首先...
在臨床診斷和生物研究中,經(jīng)常需要同時(shí)檢測(cè)一個(gè)樣本中的多個(gè)指標(biāo)。均相發(fā)光技術(shù)可以通過多種策略實(shí)現(xiàn)多重分析。空間編碼:在不同的微孔或區(qū)域進(jìn)行不同檢測(cè)。光譜編碼:使用發(fā)射不同波長(zhǎng)熒光的多種受體(如不同鑭系元素供體搭配不同顏色受體),通過檢測(cè)不同波長(zhǎng)通道的信號(hào)來區(qū)分不同靶標(biāo)。時(shí)間編碼:利用具有不同熒光壽命的供體。Alpha技術(shù)中也可以使用發(fā)射不同波長(zhǎng)熒光的受體珠。這些多重均相檢測(cè)方案能夠在單次反應(yīng)中獲取更多信息,節(jié)省樣本和試劑,提高檢測(cè)效率。專注體外診斷,均相化學(xué)發(fā)光凍干試劑,品質(zhì)值得信賴!廣東浦光生物均相發(fā)光的原理均相發(fā)光是一種先進(jìn)的生物化學(xué)檢測(cè)技術(shù),其關(guān)鍵特征在于整個(gè)檢測(cè)反應(yīng)過程均在均一的液相中進(jìn)...
離子通道和轉(zhuǎn)運(yùn)體是重要的藥物靶點(diǎn),但傳統(tǒng)電生理方法通量極低。基于化學(xué)發(fā)光的離子敏炎癥料或蛋白,為高通量篩選提供了可能。例如,使用對(duì)鈣離子敏感的水母發(fā)光蛋白(Aequorin)或基于熒光素酶的鈣指示劑(如Photina)。當(dāng)離子通道開放引起離子內(nèi)流時(shí),會(huì)觸發(fā)這些蛋白的化學(xué)發(fā)光反應(yīng)。將穩(wěn)定表達(dá)該報(bào)告系統(tǒng)和目標(biāo)離子通道的細(xì)胞系用于篩選,加入化合物后直接測(cè)量發(fā)光信號(hào)變化,即可高通量地發(fā)現(xiàn)通道的激動(dòng)劑或阻斷劑。類似原理也可用于鈉、鉀等離子通道或某些轉(zhuǎn)運(yùn)體的功能研究。均相化學(xué)發(fā)光對(duì)檢測(cè)環(huán)境有什么特殊要求?湖北技術(shù)升級(jí)均相發(fā)光免疫診斷試劑Alpha(Amplified Luminescent Proximi...
GPCR是比較大的藥物靶點(diǎn)家族,其功能研究涉及配體結(jié)合、第二信使產(chǎn)生、下游信號(hào)通路活化等多個(gè)層面。均相發(fā)光技術(shù)多方面滲透于此領(lǐng)域。對(duì)于配體結(jié)合競(jìng)爭(zhēng)實(shí)驗(yàn),可采用TR-FRET,將受體標(biāo)記供體,配體標(biāo)記受體。對(duì)于GPCR活化后比較關(guān)鍵的cAMP積累或IP3/DAG產(chǎn)生,均有成熟的均相檢測(cè)試劑盒。例如,cAMP檢測(cè)常采用基于抗體競(jìng)爭(zhēng)原理的均相發(fā)光免疫分析。細(xì)胞裂解后,內(nèi)源性cAMP與加入的標(biāo)記cAMP競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合有限量的抗cAMP抗體。抗體結(jié)合事件通過FRET或Alpha技術(shù)被檢測(cè),信號(hào)強(qiáng)度與內(nèi)源性cAMP濃度成反比。這類方法直接在細(xì)胞裂解液中進(jìn)行,快速、靈敏,完美契合GPCR激動(dòng)劑/拮抗劑的高通量篩選...
離子通道和轉(zhuǎn)運(yùn)體是重要的藥物靶點(diǎn),但傳統(tǒng)電生理方法通量極低。基于化學(xué)發(fā)光的離子敏炎癥料或蛋白,為高通量篩選提供了可能。例如,使用對(duì)鈣離子敏感的水母發(fā)光蛋白(Aequorin)或基于熒光素酶的鈣指示劑(如Photina)。當(dāng)離子通道開放引起離子內(nèi)流時(shí),會(huì)觸發(fā)這些蛋白的化學(xué)發(fā)光反應(yīng)。將穩(wěn)定表達(dá)該報(bào)告系統(tǒng)和目標(biāo)離子通道的細(xì)胞系用于篩選,加入化合物后直接測(cè)量發(fā)光信號(hào)變化,即可高通量地發(fā)現(xiàn)通道的激動(dòng)劑或阻斷劑。類似原理也可用于鈉、鉀等離子通道或某些轉(zhuǎn)運(yùn)體的功能研究。均相化學(xué)發(fā)光在個(gè)性化醫(yī)療中的應(yīng)用潛力有多大?廣東均相發(fā)光技術(shù)Alpha(Amplified Luminescent Proximity Ho...
均相發(fā)光技術(shù)比較明顯的優(yōu)勢(shì)是其操作的極度簡(jiǎn)便性所帶來的高通量檢測(cè)能力。由于摒棄了所有分離步驟,典型的均相發(fā)光檢測(cè)只需將樣本、識(shí)別元件(如抗體)和發(fā)光試劑依次加入微孔板中,混合孵育后即可直接讀數(shù)。這種“加樣-孵育-檢測(cè)”的模式,將復(fù)雜的多步流程簡(jiǎn)化為一步或兩步,不僅大幅縮短了檢測(cè)時(shí)間(通常可在幾分鐘到一小時(shí)內(nèi)完成),還大限度地減少了人為操作誤差和交叉污染的風(fēng)險(xiǎn)。這一特性使其完美適配現(xiàn)代自動(dòng)化液體處理系統(tǒng)和多通道檢測(cè)儀,能夠輕松實(shí)現(xiàn)每天處理數(shù)萬(wàn)甚至數(shù)十萬(wàn)個(gè)樣本的超高通量篩選,在藥物發(fā)現(xiàn)、功能基因組學(xué)等需要海量數(shù)據(jù)積累的領(lǐng)域具有不可替代的價(jià)值。均相化學(xué)發(fā)光在激*類檢測(cè)方面有何突出表現(xiàn)?上海干式化學(xué)發(fā)...