羥乙基哌嗪乙磺酸（HEPES）是一種不能輕易穿過生物膜的緩沖。 它適用于伊立替康脂質(zhì)體，因為它可以在穩(wěn)定脂質(zhì)體外水相酸堿度為弱堿性的情況下，不改變內(nèi)水相酸性酸堿度。HEPES 的用量應(yīng)該在10-25mM 之間，10mM以下的用量會導(dǎo)致緩沖能力較弱， 25mM以上可能對一些細(xì)胞造成不良反應(yīng)。HEPES的使用以及操作應(yīng)盡量在避光的情況下進(jìn)行。這是因為在燈光下，HEPES會產(chǎn)生H2O2，而H2O2對活性的物體來說是有害的，這對培養(yǎng)的細(xì)胞會造成一定的傷害。

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三、使用注意事項濃度控制：根據(jù)藥物制劑的需求和細(xì)胞類型，嚴(yán)格控制HEPES的濃度。一般來說，藥用級HEPES的使用濃度在適宜范圍內(nèi)，以確保其緩沖效果和細(xì)胞保護(hù)作用。pH調(diào)節(jié)：在制備藥物制劑時，需要準(zhǔn)確調(diào)節(jié)溶液的pH值至適合細(xì)胞生長或藥物發(fā)揮作用的范圍內(nèi)。HEPES的加入有助于維持這一pH值的穩(wěn)定。儲存條件：HEPES粉末應(yīng)儲存在干燥、陰涼、通風(fēng)良好的地方，避免陽光直射和高溫。配制好的HEPES溶液應(yīng)存放在適當(dāng)?shù)臏囟认拢苊忾L時間暴露于空氣中或受到污染。與其他成分的兼容性：在制備藥物制劑時，需要注意HEPES與其他成分的兼容性。避免與可能產(chǎn)生不良反應(yīng)或降低藥效的成分同時使用。云南采購HEPES醫(yī)院采購注射用HEPES國產(chǎn)緩沖液CDE已登記實驗室采購；

與溫度變化的穩(wěn)定性?HEPES緩沖能力在4-37℃范圍內(nèi)變化<10%，優(yōu)于Tris緩沖液。但高溫（>50℃）會導(dǎo)致降解，需避免高壓滅菌。HEPES在低溫下仍保持良好緩沖能力，適合冷庫或冰上操作。在熱穩(wěn)定性實驗中，HEPES緩沖液能有效維持反應(yīng)體系的pH穩(wěn)定。但需注意HEPES在高溫下的降解產(chǎn)物可能干擾實驗結(jié)果。在RNA研究中的注意事項?HEPES可能抑制某些RNA酶活性，但高濃度會干擾逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)。建議在RNA提取階段使用Tris-EDTA緩沖液替代。HEPES在RNA電泳中常用作緩沖液，其低離子強(qiáng)度減少了對RNA遷移的干擾。在體外轉(zhuǎn)錄反應(yīng)中，HEPES緩沖液能維持反應(yīng)體系的pH穩(wěn)定。但需注意HEPES可能結(jié)合某些金屬離子，影響依賴金屬離子的RNA酶活性。

HEPES是一種兩性離子緩沖劑，化學(xué)式為C8H18N2O4S，分子量238.3g/mol。其pKa值為7.5（25℃），在pH6.8-8.2范圍內(nèi)具有優(yōu)異的緩沖能力。作為Good's緩沖液家族成員，HEPES對細(xì)胞無毒性，且不與金屬離子螯合，適合含金屬離子的實驗體系。其水溶性（>1M）和低滲透壓特性使其成為細(xì)胞培養(yǎng)的理想選擇。HEPES在細(xì)胞培養(yǎng)中的應(yīng)用?HEPES***用于哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)，尤其在CO2培養(yǎng)箱外操作時（如顯微鏡觀察），可替代碳酸氫鹽緩沖系統(tǒng)。推薦濃度為10-25 mM，過高濃度可能抑制細(xì)胞生長。需注意HEPES對光敏感，需避光保存。注射用HEPESCDE已登記。

Tris-HCL與HEPES（供注射用）緩沖液應(yīng)用對比

**常用的緩沖液有很多，如磷酸鹽緩沖液、Tris-HCl緩沖液、HEPES緩沖液、氨基酸緩沖液等。不同的緩沖液差別液很大，***主要來對比兩種**常用的緩沖液：Tris-HCl緩沖液與HEPES緩沖液各自的應(yīng)用對比。

1、Tris-HCl緩沖液的應(yīng)用Tris常用于蛋白或者核酸的緩沖液，其在電泳緩沖液中與甘氨酸構(gòu)成緩沖體系，穩(wěn)定電泳過程中的pH，由于其具有弱堿性，水溶液的pH在10.5左右，可通過添加HCl或者NaOH制備不同pH的緩沖液，根據(jù)緩沖理論，Tris緩沖液的有效范圍通常是pH7.0-9.2之間。此外，Tris還可以制備表面活性劑、硫化促進(jìn)劑和一些藥物（磷霉素等）的中間物，在化妝品、醫(yī)藥、涂料以及合成中均有應(yīng)用。應(yīng)用于體內(nèi)時，Tris作為一種不含鈉的氨基緩沖堿，在體液中與H2CO3結(jié)合，生成碳酸氫鹽。因此它能緩沖酸，而且能降低CO2張力，有糾正急性呼吸性酸中毒和代謝性酸中毒雙重效果，其作用較碳酸氫鈉快而強(qiáng)。HEPES緩沖液對細(xì)胞無毒性作用，它是一種氫離子緩沖劑，能較長時間控制恒定的pH范圍。使用時濃度為10-50mmol/L，一般培養(yǎng)液內(nèi)含20mmol/LHEPES即可達(dá)到緩沖能力。在體外診斷、DNA/RNA提取、脂質(zhì)體藥物等方面均有應(yīng)用。

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對細(xì)胞的保護(hù)作用降低細(xì)胞毒性：某些化學(xué)物質(zhì)在培養(yǎng)基中容易產(chǎn)生細(xì)胞毒性，影響細(xì)胞的生長和繁殖。HEPES能夠降低這些化學(xué)物質(zhì)的細(xì)胞毒性，從而保護(hù)細(xì)胞免受損傷。形成保護(hù)層：HEPES分子還可以通過吸附在細(xì)胞表面，形成一層保護(hù)層，減少細(xì)胞間的摩擦和碰撞，降低細(xì)胞的損傷風(fēng)險。這有助于提高細(xì)胞的生存率和實驗結(jié)果的可靠性。綜上所述，HEPES在細(xì)胞培養(yǎng)中發(fā)揮作用的主要原理是通過其兩性離子特性增加溶液離子濃度和滲透壓，以及通過其穩(wěn)定的緩沖能力維持細(xì)胞生長所需的pH環(huán)境。此外，HEPES還能降低細(xì)胞毒性、形成保護(hù)層等，對細(xì)胞具有保護(hù)作用。這些特性使得HEPES成為細(xì)胞培養(yǎng)中不可或缺的緩沖劑之一。湖南供注射用HEPES價格