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  • 承擔藥物安全性評價
    承擔藥物安全性評價

    腸道消化是食物在消化道中分解的過程,包括機械性消化(通過消化道肌肉搜索將食物與消化液混合并向消化道遠端推送)和化學性消化(通過消化腺分泌的消化酶將大分子分解為小分子物質的過程)。腸道內的消化液包括胰脂肪酶、胰蛋白酶、胰淀粉酶等。在受精后的26-126h,斑馬魚腸道的管腔形成,內胚層分化出連續的有功能的腸道上皮。斑馬魚腸道肌肉發達,可分為兩層平滑肌,有利于食物的蠕動消化。通過特異性的檢測試劑盒檢測OD值,可以量化斑馬魚體內胰脂肪酶和胰蛋白酶含量。斑馬魚模型評價心血管毒性。承擔藥物安全性評價對新藥研究開發過程和系統性的認識:新藥的開發和評價是一個伴隨新藥開發全過程的表現為不同階段性(臨床前、臨床開...

  • 藥效驗證試驗
    藥效驗證試驗

    在藥物開發的過程中,藥物的有效性評價是決定藥物終能否上市的關鍵之一。藥物有效性研究包括了動物試驗中的藥效學研究和人體臨床試驗中的有效性研究。對于藥物研發來說,動物藥效學試驗是人體試驗的基礎,因為如果一個化合物要作為藥物用于人類,必須要有一定的動物研究的結果,再用于人體研究,才符合倫理學的原則。因此動物研究的目的就是為保證化合物初次用于人體的安全有效性,動物試驗應顯示主要的藥效作用和毒性以及藥代動力學特性,人們需要根據動物試驗的結果為臨床試驗推薦適應癥、計算進入人體試驗的安全劑量。而只有通過人體臨床試驗證明藥物的安全有效性后,藥物才能終獲得上市,廣泛應用。斑馬魚評價炎癥反應作用。藥效驗證試驗糖尿...

  • 藥物安全性評價方法
    藥物安全性評價方法

    在一項臨床試驗設計中,無論是主要療效指標還是次要療效指標的確定,除了需要確定療效觀測指標外,更重要的是根據臨床試驗目的,以療效觀測指標為基礎確定療效評價指標。一個完整的療效指標的確定既包括療效觀測指標,也包括以療效觀測指標為基礎療效評價指標。由此可見,在臨床試驗設計中,在明確藥物的觀測指標后,還需要根據藥物臨床試驗目的和相關指標的重要性確定藥物療效評價指標。梳理現有的藥物臨床試驗指導原則和臨床試驗療效指標的設計的現狀。利用斑馬魚模型評價抗PM2.5功效。藥物安全性評價方法我們將受測試斑馬魚分成二組,分別是正常對照和服用供試品組(供試品通過溶解到養魚用水中或注射的方式攝入到斑馬魚體內),加入相應...

  • 藥效評價中心
    藥效評價中心

    我們將受測試斑馬魚分成二組,分別是正常對照和服用供試品組(供試品通過溶解到養魚用水中或注射的方式攝入到斑馬魚體內),加入相應的胰脂肪酶和胰蛋白酶特異性檢測試劑。服用供試品后,我們使用酶標儀對斑馬魚進行OD值的檢測??梢钥吹?,服用供試品組的胰脂肪酶和胰蛋白酶的OD值與正常對照組比較,有明顯性提高。1.經過每組30尾斑馬魚的對比實驗,服用供試品組與正常對照組比較胰脂肪酶和胰蛋白酶含量均有明顯的升高。2.本實驗證實了供試品具有促進腸道消化功能的作用,主要表現為增加胰脂肪酶和胰蛋白酶的含量。藥物如何進行正確分類?藥效評價中心貧血是指人體外周血紅細胞容量減少,低于正常范圍下限的一種常見的臨床癥狀。溶血性...

  • 藥物安評中心
    藥物安評中心

    貧血是指人體外周血紅細胞容量減少,低于正常范圍下限的一種常見的臨床癥狀。溶血性貧血是由于紅細胞的破壞增速、增多,超過造血補償能力范圍時所發生的一種貧血。斑馬魚造血系統的形成,包括紅系、髓系、淋系及巨核系為主的造血系統,其相關的轉錄因子及信號轉導通路同人類有高度的同源性,這些特點使斑馬魚在人類造血系統和血液疾病的研究中有著更加大量的應用。研究表明,苯肼是一種溶血劑。苯肼作用于紅細胞膜,加速膜表面亮氨酸、賴氨酸及組氨酸的水解,使大量紅細胞迅速遭到破壞;同時可選擇性地氧化膜骨架和α珠蛋白,并將磷脂酰絲氨酸易位至紅細胞表面,導致紅細胞變形性降低,增強紅細胞黏附到細胞外基質的能力從而破壞循環血中的成熟紅...

  • 中藥活性成分評估
    中藥活性成分評估

    蛋黃粉中60%為脂類,用蛋黃粉喂食斑馬魚,可以使斑馬魚血液中的脂肪含量快速升高,從而建立斑馬魚血脂高癥模型。經過油紅O特異性脂肪染色(與組織內甘油三酯等脂肪滴結合呈橘紅色),血脂高斑馬魚血管內肉眼可見明顯的脂質聚積,通過靜脈注射,可見熒光標記膽固醇的積累。我們評價斑馬魚降低血脂功效有4個指標:1.斑馬魚血脂表型圖;2.斑馬魚總甘油三脂含量;3.斑馬魚膽固醇表型圖;4.斑馬魚總膽固醇含量。1.經過每組30尾斑馬魚的對比實驗,服用降脂產品組的血脂聚積情況與模型對照組比較明顯減少。2.本實驗證實了阿托伐他汀鈣、辛伐他汀、洛伐他汀類降脂產品具有明顯的降脂降膽固醇作用。利用斑馬魚模型評價鎮痛作用。中藥活...

  • 藥物安評檢測
    藥物安評檢測

    與藥效學相關的臨床前藥代動力學研究,其目的在于揭示新藥在動物體內的動態變化規律,闡明藥物的吸收、分布、代謝和排泄的過程和特點。臨床前藥代動力學研究也是支持立題依據的重要內容,藥物在體內的吸收、分布、代謝和排泄情況與藥物的實際療效及安全性密切相關,因此進行臨床前藥代動力學研究時不能孤立于藥效學和毒理研究之外,從試驗設計到結果評價都要與之緊密結合,充分發揮橋接作用。其意義在于:1.解釋動物毒性研究結果,幫助完善毒理研究的設計。2.解釋藥效學研究結果,提示藥物相互作用可能性的信息。3.提供藥效和毒性反應種屬差異的藥代動力學原因。4.為給藥途徑和劑型等改變提供安全性、有效性與劑量相關性的依據。5.為臨...

  • 藥物安評測試
    藥物安評測試

    利用斑馬魚模型評價保護心肌作用。心肌損傷多數是由于炎癥、缺血、冠狀動脈狹窄等因素引發的心肌損傷,常表現為胸悶、胸痛、氣短、四肢乏力、心慌、惡心嘔吐等癥狀。斑馬魚心臟包含心房、心室和靜脈竇,心電圖譜也與哺乳動物類似。而且斑馬魚生長發育周期短,胚胎透明易觀察,心臟在受精后48小時就發育完全,有利于開展心肌損傷保護劑的研究。鹽酸異丙腎上腺素可以誘導斑馬魚心率加快,心肌持續收縮,心肌耗氧量持續增加,心臟由代償性收縮轉化為失代償,終將導致心肌損傷,使心肌細胞凋亡。經過特異性熒光染色(凋亡細胞呈綠色),心肌損傷的斑馬魚在心臟部位會布滿凋亡細胞,可以明顯被觀察到。斑馬魚模型評價促進組織再生傷口愈合功效。藥物...

  • 動物藥效評價
    動物藥效評價

    斑馬魚和哺乳動物的心臟有相似的功能,包括血流方向、由專門的心內膜肌肉組織驅動的高壓系統、由電子系統調節的心律以及與起搏活動相關的心跳。斑馬魚對典型的心臟的藥理學反應與人類相似。斑馬魚受精后48h,心血管系統功能全,呈現出例子通道和代謝過程的復雜性。因此,可以應用斑馬魚評價藥物對心衰的防治作用。維拉帕米是苯烷胺類鈣離子拮抗劑,其誘導心力衰竭的藥理學基礎有以下三方面:(1)對心臟的抑制作用,即負性頻率、負性傳導及負性肌力作用,且為劑量依賴性;(2)擴張血管作用,即對外周血管具有明顯的擴張作用,使外周阻力降低,平均動脈壓下降;(3)減少冠脈血流,降低心肌血供。我們用維拉帕米建立斑馬魚心衰模型?;加行?..

  • 藥品功效檢驗
    藥品功效檢驗

    斑馬魚和哺乳動物的心臟有相似的功能,包括血流方向、由專門的心內膜肌肉組織驅動的高壓系統、由電子系統調節的心律以及與起搏活動相關的心跳。斑馬魚對典型的心臟的藥理學反應與人類相似。斑馬魚受精后48h,心血管系統功能全,呈現出例子通道和代謝過程的復雜性。因此,可以應用斑馬魚評價藥物對心衰的防治作用。維拉帕米是苯烷胺類鈣離子拮抗劑,其誘導心力衰竭的藥理學基礎有以下三方面:(1)對心臟的抑制作用,即負性頻率、負性傳導及負性肌力作用,且為劑量依賴性;(2)擴張血管作用,即對外周血管具有明顯的擴張作用,使外周阻力降低,平均動脈壓下降;(3)減少冠脈血流,降低心肌血供。我們用維拉帕米建立斑馬魚心衰模型。患有心...

  • 天然藥物的活性評價
    天然藥物的活性評價

    作為國內斑馬魚生物科技的佼佼者,環特生物自2010年成立之初就以首席科學家李春啟博士為首組建研發團隊,賦予“水中小白鼠”斑馬魚強大的技術先進性和前瞻性,通過活性成分篩選、功效及安全性評價,面向全球保健食品、化妝品、藥品和食品企業提供先進的產品和質控解決方案,為人們渴望的美好生活帶來更多功效可能及安全保障。目前,環特生物已擁有1500平方米按照GLP標準建造的實驗室,配備了國際先進的斑馬魚養殖設施和分析測試設備;藥物高通量篩選、化合物活性篩選。天然藥物的活性評價藥物開發理論上是一個有邏輯、有步驟的過程,在這一過程中,早期小規模研究的信息用于支持規模更大、目的性更強的后續研究。因此各期臨床研究的目...

  • 藥理實驗外包
    藥理實驗外包

    我們將受測試斑馬魚分成三組,分別是正常對照組、模型對照組和抗結腸炎藥物組。其中正常對照組未攝入TNBS,模型對照組與抗結腸炎藥物組都加入了等量的TNBS(TNBS通過溶解到養魚用水中的方式攝入到斑馬魚體內)??菇Y腸炎藥物組在攝入TNBS的同時攝入潑尼松之類抗結腸炎藥物。服用一段時間抗結腸炎藥物組后,我們觀察斑馬魚的腸腔面積變化、杯狀細胞數量。可以看到,服用抗結腸炎藥物的腸腔面積與未加TNBS的正常對照組比較相似,沒有明顯的腸腔面積擴大。評價疏肝解酒酒精性脂肪肝防治功效。藥理實驗外包我們將受測試斑馬魚分成三組,分別是正常對照組、模型對照組和抗心衰藥物組。其中正常對照組未攝入維拉帕米,模型對照組與...

  • 藥物研究實驗方案
    藥物研究實驗方案

    曾經,很有效果的藥物是從植物或動物中提取的某些物質。草藥學是一門研究植物藥用價值的科學,早在5000多年前就被中國所認識,如今在世界的許多地方盛行。幾乎所有當前使用的藥物都是在實驗室研發,然后經過各種化學合成過程加工而成的。大約有1/4的藥物來自植物或者其他的生物。大部分藥物是化學合成的類似物,但仍有一些藥物是用天然原料提取而成的。例如,阿片類藥物,許多藥物和一些愈療重大疾病類藥物仍然是自然產生的。植物來源的藥物與草藥的主要區別在于這些藥物已經經過徹底檢驗證實它們是有效的且是安全的。利用斑馬魚模型評價軟骨修復功效。藥物研究實驗方案細胞色素P450酶是許多同工酶組成的超大家族,主要位于肝臟微粒體...

  • 藥物副作用檢測
    藥物副作用檢測

    斑馬魚的基因與人類基因的相似度達到87%,斑馬魚肝臟中有許多與哺乳動物同源的脂質代謝酶,與哺乳動物對外源化學物質的防御機制相當,包括酶的誘導和氧化應激。而且斑馬魚幼魚通體透明,容易觀察到毒性表型。酒精性肝損傷是全世界發病率和死亡率的主要原因,酒精性肝損傷是過量飲酒的結果。當患者繼續飲酒時,會誘發嚴重的肝損傷形式,如脂肪性肝炎,纖維化,肝硬化和肝細胞。用乙醇可以誘發斑馬魚肝臟損傷,模擬人的肝臟疾病。我們評價斑馬魚肝臟毒性有4個指標:1.肝臟面積;2.肝臟變性程度;3.卵黃囊吸收延遲的發生率(卵黃囊是脂肪,卵黃囊吸收與肝功能密切相關);4.肝臟病理切片。藥物臨床前研究實驗。藥物副作用檢測正常成人的...

  • 在藥效中評價藥物安全性
    在藥效中評價藥物安全性

    我們將受測試斑馬魚分成三組,分別是正常對照組、模型對照組和腎保護劑組。其中正常對照組未攝入馬兜鈴酸,模型對照組和腎保護劑組都攝入了等量的馬兜鈴酸(馬兜鈴酸通過溶解到養魚用水中的方式攝入到斑馬魚體內)。腎保護劑組在攝入馬兜鈴酸的同時攝入山牡荊水提取物之類的腎保護劑。檢測腎小球濾過率的斑馬魚在實驗過程中需額外靜脈注射熒光物質。服用一段時間腎保護劑后,1.統計斑馬魚腎性水腫的發生率,2.用熒光顯微鏡拍照,通過斑馬魚全身熒光強度分析腎小球濾過率。利用斑馬魚模型評價改善心動過緩功效。在藥效中評價藥物安全性我們將受測試斑馬魚分成三組,分別是底物對照組、正常對照和服用供試品組(供試品通過溶解到養魚用水中攝入...

  • 藥品安全性評價研究所
    藥品安全性評價研究所

    藥物評價是研究藥物與人體之間的相互作川及其規律。藥物安全性評價的重要性任何藥物都具有兩重性,如藥物,它一方面可以殺滅病源菌,使病人的生理,生化機能恢復正常,另一方面也可危害機體,產生不良反應.尤其是20世紀60年代初,在歐洲發生反應停(thalidomide)事件,累及28個國家后,對藥物的安全性評價,引起各國和世界衛生組織的高度重視.近年來,在新藥臨床試驗中,要實施新藥臨床試驗規范(Good Clinical Practice,GCP),執行赫爾辛基宣言,保護受試者權益,使病人在藥物治療中獲得比較大效益,而冒小風險.因此對藥物進行評價,藥物的有效性和安全性兩者應放在同等位置,均不容忽視.利用...

  • 內服中藥的有效性評價
    內服中藥的有效性評價

    基于斑馬魚模型實驗,可進行活性化合物發現、高通量藥物篩選、藥效評價、安全性評價、生物學質量控制等臨床前研究,實驗周期短、成本低,結果直觀,助力醫藥企業的藥物研發、品控及宣傳推廣。利用斑馬魚模型評價抗腫瘤作用【評價原理】近三十年來,世界**發病率以年均3-5%的速度遞增,*類已成為人類**死因。1.**生長、轉移將熒光標記的人腫瘤細胞(呈紅色)移植到野生型斑馬魚體內,腫瘤細胞在斑馬魚體內的生長和轉移情況可以被觀察到。2.腫瘤部位新生血管將熒光標記的人腫瘤細胞(呈紅色)移植到轉基因血管熒光斑馬魚(呈綠色)體內,腫瘤細胞刺激斑馬魚新生血管情況可以被觀察到。3.腫瘤細胞凋亡將人腫瘤細胞移植到野生型斑馬...

  • 上海藥理藥效實驗
    上海藥理藥效實驗

    藥物開發理論上是一個有邏輯、有步驟的過程,在這一過程中,早期小規模研究的信息用于支持規模更大、目的性更強的后續研究。因此各期臨床研究的目的是不盡相同的。I期臨床試驗I期臨床試驗是初步的臨床藥理學及人體安全性評價試驗。目的:I期臨床中耐受性試驗目的是對新藥的人體初步安全性進行評價,是評價人體對藥物的耐受性、了解藥物動力學及藥效學分類、藥物代謝和藥物相互作用的研究、評估藥物活性。內容:為達到以上目的,就需要進行劑量——耐受性研究(即初試劑量和耐受性評估),單劑量、多劑量的藥物動力學和/或藥效學研究,藥物相互作用研究。利用斑馬魚模型評價降血脂作用。上海藥理藥效實驗隨著電子產品的大量使用,用眼的時間和...

  • 藥物有效性評價費用
    藥物有效性評價費用

    貧血是指人體外周血紅細胞容量減少,低于正常范圍下限的一種常見的臨床癥狀。溶血性貧血是由于紅細胞的破壞增速、增多,超過造血補償能力范圍時所發生的一種貧血。斑馬魚造血系統的形成,包括紅系、髓系、淋系及巨核系為主的造血系統,其相關的轉錄因子及信號轉導通路同人類有高度的同源性,這些特點使斑馬魚在人類造血系統和血液疾病的研究中有著更加大量的應用。研究表明,苯肼是一種溶血劑。苯肼作用于紅細胞膜,加速膜表面亮氨酸、賴氨酸及組氨酸的水解,使大量紅細胞迅速遭到破壞;同時可選擇性地氧化膜骨架和α珠蛋白,并將磷脂酰絲氨酸易位至紅細胞表面,導致紅細胞變形性降低,增強紅細胞黏附到細胞外基質的能力從而破壞循環血中的成熟紅...

  • 多肽藥物體外藥效評價
    多肽藥物體外藥效評價

    我們將受測試斑馬魚分成兩組,分別是正常對照組和服用生長發育促進劑組(維生素D3、碳酸鈣之類的生長發育促進劑通過溶解到養魚用水中的方式攝入到斑馬魚體內)。服用一段時間生長發育促進劑后,我們對斑馬魚做骨骼特異性熒光染色,觀察斑馬魚脊椎骨的發育情況??梢钥吹?,服用生長發育促進劑的脊椎骨數量明顯比正常對照組增多。 1.經過每組30尾斑馬魚的對比實驗,服用生長發育促進劑的斑馬魚脊椎骨數量比正常對照組增多。2.本實驗證實了維生素D3、碳酸鈣具有明顯促進生長發育功效。利用斑馬魚模型評價保護聽力作用。多肽藥物體外藥效評價我們將受測試斑馬魚分成三組,分別是正常對照組、模型對照組和服用免疫調節劑組。其中正常對照組...

  • 皮膚用藥功效評價方法
    皮膚用藥功效評價方法

    我們將受測試斑馬魚分成三組,分別是正常對照組、模型對照組和抗心衰藥物組。其中正常對照組未攝入維拉帕米,模型對照組與抗心衰藥物組都攝入了等量的維拉帕米(維拉帕米通過溶解到養魚用水中的方式攝入到斑馬魚體內)。抗心衰藥物組在攝入維拉帕米的同時加入地高辛、美托洛爾類的抗心衰藥物。服用一段時間抗心衰藥物后,觀察斑馬魚心包水腫和靜脈淤血的情況;用心跳血流分析系統檢測心搏出量和血流速度的情況??梢钥吹?,服用抗心衰藥物組的心包面積和靜脈瘀血面積與未攝入維拉帕米的正常對照組基本相似,沒有明顯的心衰情況。利用斑馬魚模型實驗評價通便功效。皮膚用藥功效評價方法腦出血是指非外傷性腦實質內部血管破裂引發的腦內出血病癥,占...

  • 藥物藥效試驗價格
    藥物藥效試驗價格

    利用斑馬魚模型評價生殖毒性。斑馬魚成魚體長5cm左右,其胚胎透明,在受精72h后完成孵化,并在孵出后3個月內性成熟。成年斑馬魚的繁殖周期短(一般7d左右),若條件適宜,成年雌性斑馬魚可定期產卵(每次200~300個)。在斑馬魚的早期胚胎及幼體的發育過程中,尚無性別分化,原始性腺都是相同的且具有雙向發育的潛能,易受環境(溫度、光照、pH值等)因素的影響而改變其遺傳性別。對于雌性斑馬魚而言,產卵量是評價其繁殖力的常用生物指標,它與魚類繁殖過程中的多個環節(卵子發育、雌雄交配行為等)相關,并對環境化學物質具有高敏感性,能直接反應魚類繁殖力變化。環境化學物質除了直接對親代斑馬魚的生殖系統造成損害,還可...

  • 怎樣評價藥物的安全性
    怎樣評價藥物的安全性

    曾經,很有效果的藥物是從植物或動物中提取的某些物質。草藥學是一門研究植物藥用價值的科學,早在5000多年前就被中國所認識,如今在世界的許多地方盛行。幾乎所有當前使用的藥物都是在實驗室研發,然后經過各種化學合成過程加工而成的。大約有1/4的藥物來自植物或者其他的生物。大部分藥物是化學合成的類似物,但仍有一些藥物是用天然原料提取而成的。例如,阿片類藥物,許多藥物和一些愈療重大疾病類藥物仍然是自然產生的。植物來源的藥物與草藥的主要區別在于這些藥物已經經過徹底檢驗證實它們是有效的且是安全的。斑馬魚評價胃腸道粘膜損傷輔助保護功效。怎樣評價藥物的安全性隨著電子產品的大量使用,用眼的時間和強度已遠超過去,用...

  • 評定一個藥物的安全性
    評定一個藥物的安全性

    我們將受測試斑馬魚分成三組,分別是正常對照組、模型對照組和腎保護劑組。其中正常對照組未攝入馬兜鈴酸,模型對照組和腎保護劑組都攝入了等量的馬兜鈴酸(馬兜鈴酸通過溶解到養魚用水中的方式攝入到斑馬魚體內)。腎保護劑組在攝入馬兜鈴酸的同時攝入山牡荊水提取物之類的腎保護劑。檢測腎小球濾過率的斑馬魚在實驗過程中需額外靜脈注射熒光物質。服用一段時間腎保護劑后,1.統計斑馬魚腎性水腫的發生率,2.用熒光顯微鏡拍照,通過斑馬魚全身熒光強度分析腎小球濾過率。藥物高通量篩選、化合物活性篩選。評定一個藥物的安全性我們將受測試斑馬魚分成三組,分別是正常對照組、模型對照組和服用腦血管保護劑組。其中正常對照組未攝入辛伐他汀...

  • 關于藥品安全性評價的公司
    關于藥品安全性評價的公司

    我們先將測試斑馬魚喂食蛋黃粉和熒光標記的膽固醇(蛋黃粉和熒光標記的膽固醇通過溶解到養魚用水中的方式攝入到斑馬魚體內),建立血脂高模型后,再將受測試斑馬魚分成兩組,分別是模型對照組和服用降脂劑組,服用降脂組攝入阿托伐他汀鈣、辛伐他汀、洛伐他汀之類的降脂劑。服用一段時間降脂劑后,我們對斑馬魚整體做脂肪特異性染色,觀察體內甘油三酯聚積的變化,以及觀察體內膽固醇的聚積情況,同時利用甘油三酯和膽固醇試劑盒檢測斑馬魚體內甘油三酯和膽固醇含量的變化。利用斑馬魚模型評價促進生長發育功效。關于藥品安全性評價的公司利用斑馬魚模型評價保護腎臟功效。腎臟是人體的重要組成部分,,發揮著從血液中濾過代謝廢物并維持體內正常...

  • 中藥藥效評價報價
    中藥藥效評價報價

    我們將受測試斑馬魚分成三組,分別是正常對照組、模型對照組和服用肝保護劑組。其中正常對照組未攝入乙醇,模型對照組與服用肝保護劑組都攝入了等量的乙醇(乙醇通過溶解到養魚用水中的方式攝入到斑馬魚體內)。肝保護劑組在攝入對乙醇的同時攝入美他多辛之類的肝保護劑。服用一段時間肝保護劑后,我們在顯微鏡下觀察斑馬魚肝臟及卵黃囊表型,同時制作成病理切片觀察肝臟的病理結構變化。從病理切片中也能看出來,正常對照組肝細胞核規則清晰,肝細胞結構正常,邊緣清晰。乙醇處理后,斑馬魚肝細胞結構模糊、肝細胞核腫大,肝組織出現脂肪空泡樣變性,而肝保護劑組細胞和正常斑馬魚中形態相似。斑馬魚模型評價胃腸道毒性。中藥藥效評價報價斑馬魚...

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